一、肺间质纤维化治疗的实验和临床研究进展（论文文献综述）
赵红舟[1]（2021）在《五味子乙素对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用及机制研究》文中进行了进一步梳理特发性肺间质纤维化（Idiopathic Pulmonary Fibrosis,IPF）是一种慢性、炎症性、间质性肺疾病,好发于中老年人群,具有进行性、不可逆转和致死性的特点。IPF在世界范围内的发病率正在逐年增加,患者5年内生存率低于30%。IPF的具体临床表现是劳力性呼吸困难,随病情发展进行性加重,伴有呼吸急促、鼻翼煽动,严重时可出现口唇发绀、胸廓扩张、膈肌活动度下降等,需要制氧机辅助呼吸;咳嗽咳痰方面,早期临床表现主要是干咳或咳黏液痰,若出现肺部感染则可见血性痰或脓痰;疾病后期患者生活质量严重下降,死亡常见原因是呼吸衰竭。目前研究发现吡非尼酮和尼达尼布等抗纤维化药物可改善IPF患者症状以及延缓肺功能下降,但不能显着提高患者的生存率及改善患者后期的生存质量,且安全性未得到充分证明。除此以外,在治疗肺纤维化的过程中还有应用糖皮质激素类、免疫抑制剂和细胞毒性药物的情况,但长期应用具有明显的副作用。近几年来,祖国医学对IPF的研究热度逐渐上升,并取得了相应的成就,可用于指导临床。除此以外,中药复方及中药单体在治疗IPF上也发挥其独特的作用。因此,探索中药草药及相关制剂在治疗特发性肺间质纤维化的表现机制就很有必要。研究目的本研究采用博来霉素导致的肺纤维化小鼠作为模型,通过分析相关的纤维化、氧化及抗氧化指标的水平,探究五味子乙素对肺纤维化的干预作用及其作用机制。研究方法24只健康雄性C57BL6小鼠随机分为空白组、模型组和Sch-B组,每组8只,适应性喂养1周后,在麻醉状态下,空白组气管内滴入0.9%氯化钠注射液（NS）,其余两组小鼠经气管给予博来霉素建立肺纤维化模型。造模后第二天,空白组和模型组每日灌胃给予0.9%NS,Sch-B组灌胃给予五味子乙素治疗。各组均于第14天脱臼处死,进行HE染色和Masson染色观察肺组织病理变化。用酶联免疫吸附（ELISA）试剂盒检测8-异前列腺素（8-iso-PGF）、羟脯氨酸（HYP）的含量,观察各组小鼠肺组织氧化损伤程度和纤维化程度。用PCR检测超氧化物歧化酶（SOD）、血红素氧合酶（HO—1）的含量,观察各组小鼠肺组织抗氧化损伤程度。通过以上检测方法评价治疗效果。研究结果HE染色结果显示:与模型组小鼠相比,Sch-B组小鼠肺泡破坏和间隔增厚程度相对较轻,炎症细胞浸润相对较少,肺间质纤维化程度相对较轻,肺泡结构破坏程度和炎症程度明显减轻,肺组织炎性评分明显低于模型组（P<0.01）。Masson染色结果显示:与模型组小鼠相比,Sch-B组小鼠肺组织肺泡结构破坏程度相对较轻,肺间质、支气管壁和肺泡隔被蓝染区域的面积相对较少,胶原纤维的形成和胶原沉积面积明显低于模型组（P<0.01）。荧光定量PCR检测结果显示:Sch-B组小鼠SOD和HO-1水平均明显高于模型组（P<0.01）。酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定结果显示:Sch-B组小鼠HYP水平和8-iso-PGF水平均明显低于模型组（P<0.01）。研究结论五味子乙素可能通过提高组织抗氧化水平、降低炎症反应和氧化损伤程度,抑制肺纤维化的进程,达到减轻肺纤维化程度的目的。
蔡松[2]（2021）在《肺纤维化的六经辨证研究及大黄（？）虫丸干预肺纤维化大鼠的实验研究》文中认为目的通过临床研究,总结肺纤维化的六经分布规律,研究肺纤维化六经辨证分型与一般情况、主要症状、评分指标及血瘀兼证的相关性,探讨血瘀兼证在肺纤维化六经辨证中的意义,为肺纤维化临床辨证论治提供思路延展。通过动物实验,探究大黄（?）虫丸对博来霉素诱导的肺纤维化大鼠肺功能及生存状态的影响,并从大黄（?）虫丸对TGF-β1/Smad3信号通路的影响探讨其干预肺纤维化的作用机制。方法临床部分:本研究通过调查问卷的方式采集入组患者的一般资料、病史、四诊信息等,进行六经辨证分型,并对血瘀兼证患者进行积分量化,使用SPSS软件进行统计学分析,以期总结出肺纤维化患者的六经辨证分型特点及与一般情况、主要症状、评分指标、血瘀兼证之间的关系,以研究肺纤维化的六经辨证规律。实验部分:采用气管内滴入博来霉素复制大鼠肺纤维化模型。大鼠随机分为空白组（A）、模型组（B）、吡非尼酮组（C）、大黄（?）虫丸大剂量组（D）、大黄（?）虫丸中剂量组（E）、大黄（?）虫丸小剂量组（F）六组。观察大鼠的生存状态,给药28天后检测肺功能。取肺组织观察病理变化,实时PCR检测TGF-β1、Ⅰ型胶原及Smad3蛋白的mRNA表达;Western blot法检测Smad3、p-smad3的蛋白表达水平。结果临床部分:1.99例患者中男性患者59例,女性患者40例,其中患者年龄最小的为28岁,年龄最大的为93岁,所有患者平均年龄为63.18±12.06岁,年龄分布以61-70岁之间最多,病程在1-3年之间最多。有吸烟史的患者有46例,其中男性占绝大多数。接触异物的患中接触粉尘的最多。合并循环、呼吸系统疾病者较多。2.有咳嗽症状的患者有88例,轻度咳嗽者居多,咳嗽无明显规律的患者最多。64例患者有咯痰,咳痰量为中量、黄白相兼的粘稠痰者最为多见,咯痰难易无明显差异。93.9%的患者出现气短,61-70岁这一年龄段的患者最多,轻度气短的患者最多。87.9%的患者出现喘息,轻度喘息的患者最多,61-70岁之间的患者最多。出现最多的症状为口干,口苦,胸闷,乏力,面色萎黄;舌暗红,苔薄黄,脉弦细最为多见。3.属于血瘀证的患者有89例。其积分最小的为3分,最大的为12分,平均值为5.87±1.65分,中度血瘀的患者最多。mMRC呼吸困难指数评分为1分的患者最多,占比为46.5%;4.六经辨证中单经病76例,其中少阳病为最多见,有46例;最少的是太阳病,仅有1例,占比为1.0%。两经合病22例,有四种合病类型,分别是太阳少阳、阳明少阳、少阳太阴、阳明太阴,其中以阳明少阳合病最为多见,有13例;太阳少阳合病与阳明太阴合病最少,各仅有1例。四经合病仅有1例,为阳明少阳太阴少阴合病。5.肺纤维化的六经辨证与患者性别、年龄、病程、咳嗽程度、气短程度、喘息程度、mMRC评分不具有明显相关性。6.肺纤维化的六经单经辨证分型与咯痰量有关,咯痰量大者与少阴病有关,咯痰量少者与太阴病有关;肺纤维化的六经合病辨证分型与血瘀兼证的分级有关,中度血瘀者与阳明少阳合病、少阳太阴合病有关;重度血瘀者与少阳太阴合病有关。实验部分:1.模型组～中剂量组大鼠死亡率相近,小剂量组造模后无死亡;与空白组相比,模型组FVC、FEV0.2、CL降低（P<0.05）,Ri、Re、0.2秒率升高（P<0.05）;与模型组比较,吡非尼酮组～小剂量组Ri、Re降低（P<0.05）,CL升高（P<0.05）,中剂量组、小剂量组FVC、FEV0.2升高（P<0.05）,0.2秒率降低（P<0.05）,小剂量组PEF升高（P<0.05）;病理可见模型组大鼠肺泡结构破坏,炎细胞浸润,胶原大量沉积,纤维化改变明显,吡非尼酮组～小剂量组纤维化程度较模型组减轻,以小剂量组最为明显。2.病理:模型组纤维化改变明显,小剂量组纤维化程度为各用药组中最轻。PCR:较空白组相比,模型组～中剂量组大鼠TGF-β1、Smad3及Collagen Ⅰ的基因表达均显着升高（P<0.01）,小剂量组Smad3、Collagen Ⅰ的基因表达显着升高（P<0.01）,TGF-β1的基因表达明显升高（P<0.05）;较模型组相比,小剂量组TGF-β1、Smad3的基因表达显着降低（P<0.01）,Collagen Ⅰ的基因表达明显降低（P<0.05）;较吡非尼酮组相比,小剂量组TGF-β1的基因表达显着降低（P<0.01）,Smad3、Collagen Ⅰ的基因表达明显降低（P<0.05）。Western blot:与空白组相比,模型组Smad3蛋白表达明显升高（P<0.05）、模型组～大剂量组p-smad3蛋白表达均显着升高（P<0.01）,中剂量组p-smad3蛋白表达明显升高（P<0.05）;与模型组相比,中剂量组Smad3、大剂量组p-smad3蛋白表达明显降低（P<0.05）,中剂量、小剂量组p-smad3蛋白表达均显着降低（P<0.01）;与吡非尼酮组相比,小剂量组p-smad3蛋白表达显着降低（P<0.01）。结论从99例肺纤维化患者资料临床观察结果分析,可以认为:1.肺纤维化的六经单经病以少阳病为主,两经合病以少阳阳明合病为多,多经合病可见阳明少阳太阴少阴合病。2.肺纤维化的六经辨证与患者性别、年龄、病程、咳嗽程度、气短程度、喘息程度、mMRC评分不具有明显相关性。3.肺纤维化的六经单经辨证分型与咯痰量有关,咯痰量大者与少阴病有关,咯痰量少者与太阴病有关;肺纤维化的六经合病辨证分型与血瘀兼证的分级有关,中度血瘀者与阳明少阳合病、少阳太阴合病有关;重度血瘀者与少阳太阴合病有关。4.肺纤维化患者多兼见血瘀证,血瘀程度以中度者为多,结合肺纤维化的六经辨证特点,提示肺纤维化与少阳三焦及血瘀兼证关系密切。从本研究实验部分的结果分析,可以认为:大黄（?）虫丸可改善博来霉素致肺纤维化大鼠肺功能指标及疾病状态,小剂量使用效果更佳,对肺纤维化大鼠的存活有保护作用,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad3信号通路,减少细胞外基质沉积有关。但小剂量是否为大黄（?）虫丸的最佳使用剂量,仍需更多的重复实验及更进一步的研究后方能最终确定。
章莉[3]（2021）在《“党参平肺活血汤”治疗肺间质纤维化气阴两虚夹瘀证的临床疗效观察》文中提出目的:观察“党参平肺活血汤”治疗肺间质纤维化气阴两虚夹瘀证的临床疗效和安全性,为该病的治疗策略提供新思路。方法:采用对照研究的方法,选取2020年5月至2021年2月在南京中医药大学附属医院就诊的符合肺间质纤维化诊断标准的患者,将其分成治疗组和对照组,对照组按照西医常规治疗,治疗组将“党参平肺活血汤”和常规西医治疗联合使用,疗程为3个月。对两组治疗后的中医症候积分及总有效率、圣乔治呼吸问卷评分、6分钟步行距离试验、经皮血氧饱和度、用力肺活量、第1秒用力呼气量、一氧化碳弥散及不良事件的发生情况进行观察分析,以评价“党参平肺活血汤”治疗肺间质纤维化的临床疗效及安全性。结果:1.治疗前治疗组和对照组患者的一般资料（性别、年龄、病程）、中医症候积分（18.52±4.94 vs 17.75±5.95）、圣乔治呼吸问卷总评分（28.01±12.03 vs 33.95±12.65）、圣乔治呼吸问卷症状评分（48.96±16.62 vs 54.71±15.39）、圣乔治呼吸问卷活动评分（28.51±17.40 vs 34.19±12.90）、圣乔治呼吸问卷心理评分（20.23±11.42 vs 24.06±13.22）、6分钟步行距离试验（459.87±65.19m vs 446.13±63.48m）、经皮血氧饱和度（94.22±2.34%vs 93.05±2.11%）、用力肺活量（2.31±0.76L vs 2.42±0.70L）、第1秒用力呼气量（1.91±0.58L vs 2.01±0.59L）、一氧化碳弥散（4.94±1.25mmol/min/kPa vs 4.64±1.33mmol/min/kPa）指标无明显差异（P>0.05）。2.中医症候积分及总有效率:经治疗后,治疗组中医症候积分为10.65±5.08分,对照组的中医症候积分为14.30±4.22分,两组中医症候积分均较前降低,且差异具有统计学意义（P<0.01）。将两组治疗后的中医症候积分进行比较,治疗组的积分低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。在中医症候积分总有效率方面,治疗组总有效率为78%,对照组为35%,治疗组总有效率高于对照组,差异具有统计学意义（P<0.01）。3.圣乔治呼吸问卷评分:经治疗后,治疗组总评分为19.45±9.37分,对照组总评分为25.07±6.27分,两组总评分均较治疗前明显改善（P<0.01）。将两组治疗后的总评分进行组间比较,治疗组明显低于对照组（P<0.01）。在症状评分方面,治疗组在治疗后的评分为40.25±14.96分,较治疗前明显改善（P<0.05）,对照组治疗后的评分为52.79±13.26分,较前无明显改善（P>0.05）;在活动评分方面和心理评分方面,治疗组评分（18.64±11.36;11.24±6.82）较前改善（P<0.01）,对照组评分（25.04±8.35;18.35±8.47）也较治疗前明显改善（P<0.05）。经治疗后,治疗组症状、活动和心理3项评分均明显优于对照组（P<0.05）。4.6分钟步行距离试验和经皮血氧饱和度:经治疗后,治疗组6分钟步行距离为507.84±75.58m,经皮血氧饱和度结果为95.13±1.69%,与治疗前比较均有改善（P<0.05）,而对照组的6分钟步行距离（465.21±56.22m）和经皮血氧饱和度（94.05±1.79%）均较前无明显改善（P>0.05）,将治疗组和对照组两组治疗后6分钟步行距离和经皮血氧饱和度分别进行组间比较,治疗组的结果均明显优于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。5.肺功能:治疗组的用力肺活量（2.29±0.78L）、第1秒用力呼气量（2.00±0.71L）、一氧化碳弥散（4.85±1.13mmol/min/kPa）与治疗前比较均无显着性差异（P>0.05）,对照组用力肺活量（2.31±0.68L）、第1秒用力呼气量（1.94±0.61L）、一氧化碳弥散（4.31±1.38 mmol/min/kPa）也较前无显着性差异（P>0.05）。经治疗后,治疗组用力肺活量、第1秒用力呼气量、一氧化碳弥散结果与对照组相比,差异无统计学意义（P>0.05）。6.安全性评价:治疗3个月内,治疗组和对照组发生的白细胞降低、谷丙转氨酶升高比较无统计学意义（P>0.05）。结论:“党参平肺活血汤”联合西医常规治疗对肺间质纤维化气阴两虚夹瘀证具有临床疗效,可改善患者临床症状,增加运动耐量,改善心理状况,提高生活质量,安全性良好。
刘学[4]（2020）在《肺纤维化大鼠全转录组测序分析及加味补阳还五汤调控Notch/Jagged通路抗纤维化的机制研究》文中提出[目的]肺纤维化,也称之为肺间质纤维化（fibrosispulmonary,PF）,是一种弥漫性肺部炎性疾病,由多种原因引起,病变部位主要累及肺间质以及肺泡上皮细胞和肺血管。主要病理改变有肺泡结构紊乱、弥漫性肺泡炎和肺纤维化,临床表现为进行性加重的呼吸困难,刺激性干咳,其发病特点主要包括限制性的通气功能障碍、低氧血症以及慢性、进行性、弥漫性肺间质的纤维化。临床发病率、死亡率高,高度影响到人们的生命健康安全,当下研究人员并未开发出十分有针对性的治疗药物。肺纤维化大鼠全基因组高通量测序分析发现,Notch1/Jagged1信号通路在肺纤维化中广泛存在。研究发现一些中药复方或单药能通过激活Notch1/Jagged1通路调节肺纤维化的发生发展。本实验基于国家自然科学基金“基于miRNA探讨加味补阳还五汤干预肺纤维化大鼠微血管新生的分子机制及物质基础研究（编号:81874442）”的研究结果,通过实验验证加味补阳还五汤对Notch这一通路的干预作用,进而在人胚肺成纤维细胞（MRC-5）通过TGF-β刺激造模前后分别给予加味补阳还五汤干预,应用si-RNA技术干预Notch/Jagged1通路表达,探讨加味补阳还五汤抗肺纤维化的具体作用机制及特点。[方法]1.肺纤维化大鼠全转录组高通量测序分析。选取12只7周SD大鼠随机分成两组,对照组和实验组各6只,模型组进行纤维化造模,空白组不予处理,处理28天后,断椎处理大鼠,取肺部组织分别保存于液氮和4%多聚甲醛固定液中,用于后续RNA测序和病理切片观察。切片HE染色证实肺纤维化造模成功与否。通过高通量测序对实验组和对照组进行测序和分析,分别对lnc RNAs,mRNAs,circ RNAs和miRNAs的表达模式进行了分析,同时对差异表到的ce RAN进行了筛选,同时进行GO和KEGG富集分析挖掘与纤维化相关的通路及基因。2.加味补阳还五汤对肺纤维化大鼠肺组织病理形态的实验观察。分为空白组,模型组,中药（加味补阳还五汤）组,强的松组。利用博来霉素复制肺纤维化大鼠模型。于第14天、28天分别观察各组大鼠的一般情况,肺组织大体形态改变,HE染色、masson染色情况,Westen blot、RT-PCR法检测大鼠肺组织中Notch1、Jagged1、Hes-1蛋白及mRNA的表达。3.加味补阳还五汤干预Notch信号通路对MRC-5细胞的调节机制。应用RNA干扰技术（siRNA）筛选出干扰效果最好的靶位点,分为正常细胞组、siRNA沉默Notch1组、单纯TGF-β刺激组、siRNA沉默后TGF-β刺激组以及加味补阳还五汤干预1h后给予TGF-β处理组、Notch1siRNA转染48小时后加入加味补阳还五汤1小时后给予TGF-β刺激组。细胞生化检测siRNA沉默Notch后细胞内Jagged1、Hes-1蛋白的表达;Western blot、RT-PCR法检测各分组细胞内Notch1蛋白及mRNA的表达水平。[结果]1.肺纤维化大鼠全转录组高通量测序分析。在本研究中,通过高通量测序对实验组和对照组进行测序和分析,对lnc RNAs,mRNAs,circ RNAs和miRNAs的表达模式进行了测序分析,同时对差异表达的非编码RNA进行了筛选,并进行GO和KEGG富集分析挖掘相关信号通路及基因。全转录组测序分析发现在肺纤维化大鼠中,Notch signaling pathway信号通路被显着富集到（图2-6B）,其相关基因表达发生了明显的变化,猜测在肺纤维化的发生中,Notch信号通路具有重要的调节作用,抗纤维化药物发挥作用可能与干预这一通路密切相关,具体的调控机制需进一步进行验证,为后续实验提供了有利证据。2.加味补阳还五汤对肺纤维化大鼠肺组织病理形态的实验观察。2.1 HE染色示:与空白组相比较,各给药组第14d时肺组织依然保持相对完整,组织内部表现出轻微的水肿,相关炎性细胞的浸润情况明显,病变状态加味补阳还五汤组较强的松组轻;而发展到第28d时相关细胞表现出增生,胸膜等位置出现了胶原蛋白沉积状况,并能够观察到明显的肺纤维化趋势,加味补阳还五汤组纤维化程度较强其他组明显降低。2.2 Masson染色状态:与空白组对照,实验鼠的支气管的胶原层厚度很小,可以观察到一定颜色的纤维分布状态。而对于模型组来说,在第14d时内部不同肺泡的宽度变大,而在肺间质等位置都能够观察到成纤维细胞的出现,存在一定程度的蓝色形式的沉积情况;在第28d肺泡的结构呈现出高度破坏,肺间质维持可观察到束状或者其他形式的纤维沉积情况,发展为代表性的纤维化状态。加味补阳还五汤组肺组织纤维化程度较模型组明显降低,与强的松组相比亦明显改善。2.3 Westen blot结果显示,与空白组比较,模型组大鼠肺组织内Notch1、Jagged1、Hes-1蛋白明显升高（P<0.01）,其中第28d蛋白的表达量升高最为明显;加味补阳还五汤组与强的松组各时间点Notch1、Jagged1、Hes-1蛋白的表达量较模型组显着下降,其中加味补阳还五汤组第28天下降最明显,与强的松组相比具有统计学意义（P<0.05）。药物组各时间点蛋白的表达量和模型组同期相比均降低。2.4 RT-PCR法结果可以看出,与正常组相比,模型组、强的松组、加味补阳还五汤组Notch1、Jagged1、Hes-1mRNA含量水平都显着提升,组内两两对比差异性明显,具有统计学意义（0.05<P）;和模型组进行对比,相应地通过强的松、加味补阳还五汤干预后,Notch1、Jagged1、Hes-1mRNA相对表达量有所下降,其中以加味补阳还五汤组干预28天下降最明显,组内两两比较差异性明显（P<0.05）,具有统计学意义。强的松组与加味补阳还五汤组同期组内相比,具有统计学意义。3.加味补阳还五汤干预Notch信号通路对MRC-5细胞的调节机制。3.1细胞生化检测siRNA沉默Notch后细胞内Jagged1、Hes-1蛋白的表达,结果提示:与正常细胞组相比,siRNA沉默Notch1组,细胞内Jagged1、Hes-1的表达出现明显降低,应用TGF-β造模后,细胞内Jagged1、Hes-1的表达出现明显升高,与模型组相比,应用Notch沉默后再给予TGF-β刺激后,细胞内Jagged1、Hes-1的表达有所下降,但是较正常组偏高。相比之下,较加味补阳还五汤组来说,不管有无运用siRNA沉默,和空白组方面进行比较,Jagged1、1-Hes的含量都出现了明显的升高,不过运用siRNA沉默组的数值明显低一些。3.2 Western blot、RT-PCR检测发现与正常细胞组相比,siRNA沉默Notch1组、siRNA沉默后TGF-β刺激组细胞内Notch1表达均明显降低。与TGF-β刺激组相比,siRNA沉默Notch1组、siRNA沉默后TGF-β刺激组中细胞内Notch1表达降低更明显。加味补阳还五汤干预1h后给予TGF-β处理组、Notch-siRNA转染48小时后加入加味补阳还五汤1小时后给予TGF-β处理组中细胞内Notch1表达降低,其中后者明显低于单纯TGF-β刺激组。[结论]加味补阳还五汤能抑制Notch/Jagged1信号通路,下调Notch1信号表达水平以发挥保护作用,进而改善MRC-5细胞的纤维化水平,猜测加味补阳还五汤通过干预Notch/Jagged1信号转导通路来发挥抗纤维化作用,并且有一定的预保护作用。
田丽[5]（2020）在《基于血管新生机制探讨miR-126对肺纤维化大鼠VEGF调控及加味补阳还五汤的干预作用》文中进行了进一步梳理目的:肺纤维化是许多不同病因肺间质性疾病的常见结局,其典型特征是细胞外基质蛋白过度沉积、血管生成和重构、肺实质不可逆瘢痕形成,导致气体交换减少和肺功能受损。本研究旨在观察博来霉素诱导的大鼠肺纤维化病程中血管新生情况,探讨加味补阳还五汤通过miR-126和VEGF在体内和体外对肺纤维化大鼠的保护作用及其机制,拟为肺纤维化的治疗提供新思路新方法。方法:1.体内实验:健康雄性清洁级SD大鼠,年龄7周,体重180±20g。随机分为对照组,模型组,强的松组,补阳还五汤组和加味补阳还五汤组。利用博来霉素气管滴入法建立肺纤维化模型。造模后24小时,对照组给予生理盐水灌胃,强的松组给予强的松混悬液（4.2mg/kg?d）灌胃,补阳还五汤组给予补阳还五汤液（4.9g/kg?d）灌胃,加味补阳还五汤组予加味补阳还五汤液（7.3g/kg?d）灌胃。各组动物均在14天、28天随机分批处死,取大鼠肺组织,HE染色观察肺组织病理变化,Masson染色观察肺组织中胶原含量、分布和形态学变化,免疫组化Ⅷ因子染色标记肺血管,显微镜下计算微血管数目,测定微血管密度（MVD）,RT-PCR法检测肺组织中miR-126及VEGF m RNA的水平,Western blot法及免疫组化法检测肺组织VEGF蛋白表达,免疫组化法比较各组肺组织中HIF-lα蛋白表达情况。2.体外实验一:在TGF-β1刺激的MRC-5中转染miR-126模拟物或抑制剂及其阴性对照物,探究miR-126与VEGF的关系。MRC-5随机分为6组:对照组,模型组,miR-126 mimics组,miR-126 mimics NC组,miR-126 inhibitor组,miR-126 inhibitor NC组。48h后收集细胞,采用MTT法检测细胞增殖。对照组、模型组应用RT-PCR法检测α-SMA和fibronectin基因表达,验证造模效果。6组均用RT-PCR法检测miR-126、VEGF m RNA水平,Western blot法比较各组VEGF、collagen I、collagen III蛋白水平,免疫荧光法观察collagen I、collagen III表达。二:探究加味补阳还五汤含药血清对TGF-β1诱导的MRC-5 miR-126、HIF-lαm RNA及VEGF的影响。MRC-5随机分为4组:对照组,模型组,正常血清组,加味补阳还五汤含药血清组。RT-PCR法检测MRC-5中miR-126、HIF-lαm RNA及VEGF m RNA的水平,Western blot法比较各组中VEGF和collagen I表达情况。结果:1.体内实验:（1）HE及Masson染色结果显示,加味补阳还五汤可以显着减轻纤维化大鼠肺组织炎症及纤维化改变,且疗效优于补阳还五汤;（2）Ⅷ因子染色结果显示,博来霉素诱导大鼠肺纤维化病程中存在病理性血管新生亢进,微血管密度增加;加味补阳还五汤可以显着抑制纤维化大鼠肺组织病理性血管新生;（3）加味补阳还五汤可以降低纤维化大鼠肺组织中miR-126、VEGF及HIF-1α蛋白的表达。2.体外实验:（1）纤维化细胞模型中,miR-126、VEGF m RNA及蛋白表达显着增加;（2）miR-126 mimics可升高miR-126、VEGF m RNA及蛋白表达水平,并促进胶原蛋白合成;miR-126 inhibitor可抑制miR-126、VEGF m RNA及蛋白表达,并降低胶原蛋白合成;（3）加味补阳还五汤含药血清可降低TGF-β1所致MRC-5胶原蛋白I合成;（4）加味补阳还五汤含药血清可降低TGF-β1所致MRC-5中miR-126、HIF-1αm RNA、VEGF m RNA及蛋白表达。结论:加味补阳还五汤对博来霉素所致肺纤维化大鼠具有明显的保护作用,且疗效优于补阳还五汤,其作用机制可能与抑制miR-126/VEGF表达从而抑制肺组织中病理性血管新生相关。
李芊芊[6]（2020）在《淫羊藿苷调控VEGF相关信号通路干预血管新生的作用及临床研究》文中提出目的:从祖国医学理论角度分析并联系临床实际情况来看,在肺纤维化的病机演变过程中肾阳虚具有重要意义,治疗上在益气、祛痰、活血、通络的基础上兼顾补肾温阳可获良效。现代医学在肺纤维化的病理及发病机制的研究中发现,血管新生异常可能诱发或加速肺纤维化进展,血管内皮生长因子（VEGF）作为一种促血管新生因子,对肺纤维化的形成与进展有干预作用。本研究通过体外细胞实验观察淫羊藿苷对肺微血管内皮细胞的影响,探究淫羊藿苷抑制血管新生作用及机制,观察VEGF相关通路关键因子的基因及蛋白表达,从而推测温肾阳中药淫羊藿是否通过干预血管新生起抗肺纤维化的作用,并寻找作用靶点,为临床用药提供实验依据。通过典型案例分析,探讨临床治疗有肾阳虚表现的肺纤维化患者的证治方药及作用机理,并总结了导师临床经验。理论探讨、临床分析与实验研究相结合以期为治疗肺纤维化提供新思路。方法:实验研究:CCK-8法检测淫羊藿苷对肺微血管内皮细胞增殖的作用及其最大无毒浓度,通过Transwell小室趋化实验、划痕愈合实验检测淫羊藿苷对肺微血管内皮细胞迁移的影响,采用ELISA法测细胞上清液中VEGF的浓度检测淫羊藿苷对细胞VEGF分泌的干预作用,Real time-PCR检测VEGF基因表达,Western blot检测血管新生相关因子VEGF、PLCγ1、PI3K、Akt的蛋白表达。实验结果及结论:淫羊藿苷能抑制肺微血管内皮细胞的增值、迁移,降低血管新生相关因子VEGF、PLC γ1、PI3K、Akt的表达水平,故推测淫羊藿苷可能通过干预VEGF等相关信号通路抑制血管新生,从而减缓肺纤维化的进展,为临床淫羊藿预防和治疗肺纤维提供实验理论依据。
李斐然[7]（2020）在《温补肾阳法干预肺纤维化大鼠PEDF、bFGF表达的实验研究及临床分析》文中研究指明目的:肺纤维化是许多病因不同的间质性肺疾病的共同结局,该病目前发病机制不明,缺乏疗效确切的治疗方法及药物。导师XX教授临床上善用温补肾阳法治疗肺纤维化,目前已有诸多研究表明,温补肾阳类药物,具有对抗肺纤维化的作用,为肺纤维化诊疗提供了新的思路。本实验拟通过临床数据分析进一步验证其临床应用的合理性,并通过动物实验探讨温补肾阳法对肺纤维化大鼠血管新生的作用机制,希望能够为临床治疗肺纤维化提供依据。方法:搜集山东中医药大学附属医院肺病科XX主任专家门诊2019年9月--2019年12月诊断为肺纤维化,证型为肺肾亏虚的门诊病历搜集55例,建立数据库,基于数据库运用Excel、SPSS等软件,对XX教授温补肾阳法的临床应用进行分析研究。通过动物实验研究,喂养大鼠36只,随机分为6组:空白组（A组）、强的松组（B组）、仙灵脾组（I组）、仙茅组（H组）、“二仙组”（K组）、模型组（X组）适应性喂养2天,除空白组外其余各组大鼠采用BLM溶液气管滴入方法建立肺纤维化大鼠模型。造模后分别予相应药物进行干预,空白组不予任何处理。造模后第14天每组随机处死3只大鼠,每组取相同部位大鼠肺组织,观察其外观和病理切片,取其血液标本。造模后第28天处死剩余大鼠,每组取肺组织观察外观和切片,ELISA法测定其微血管密度（MVD）及血清中色素上皮源性因子（PEDF）、碱性成纤维细胞因子（bFGF）表达水平。结果:1.临床分析:本研究共使用药物47种,累计中药使用590频次;本次统计出现的最常用的中药为仙灵脾,对使用的47种中药进行药类分析显示补虚药应用频率最高,补气药与补阳药占补虚药的前两位。对使用的47种中药进行性味归经显示所占药味前三位为甘、苦、辛,所占药性前三位为温、寒、平,药物归经前三位为肺、肾、脾。2.动物实验数据分析:实验第28d与14d对比,激素组和仙茅组的PEDF指标在干预前后有显着差异,PEDF水平均显着下降（P<0.05）。实验第14天,与空白组、仙灵脾组比较,二仙组bFGF表达水平显着降低（P<0.05）。与仙茅组、仙灵脾组对比,激素组、模型组bFGF水平显着升高（P<0.05）。28天与14天对比,28天二仙组bFGF表达水平较14天bFGF表达水平明显升高（P<0.05）,28天仙灵脾组bFGF表达水平明显下降（P<0.05）。同时间点各组大鼠免疫组化MVD表达比较如下:与空白组比较,模型组在第14天、第28天,肺纤维化模型组肺组织MVD值表达显着且逐渐降低（P<0.01）。实验14天,与模型组比较,激素组、二仙组MVD值表达显着降低（P<0.01）,仙灵脾MVD值表达降低（P<0.05）。与仙灵脾组比较,二仙组MVD值表达显着降低（P<0.01）。实验28天,与模型组比较,仙灵脾组肺组织MVD值表达升高（P<0.05）、二仙组肺组织MVD值表达显着升高（P<0.01）。实验28天与14天相比,仙灵脾组MVD值表达升高（P<0.05）、二仙组肺组织MVD值表达显着升高（P<0.05）3.HE染色、Masson染色观察结果:空白组大鼠不同时间点肺组织形态未见明显病变。模型组:肺泡壁增厚,肺泡壁较多蓝色着染胶原纤维增生,出现明显肺间质纤维化;造模后28d肺间质纤维化程度进一步加重。与同期模型组相比,仙茅组、仙灵脾组和二仙组、激素组肺泡炎症和肺间质纤维化程度明显降低。与其它药物组相比,不同时间点二仙组肺泡炎症和肺间质纤维化程度降低。结论:温补肾阳法在肺纤维化治疗中效果显着且常用,温补肾阳法可通过调控血管生成相关因子、改善肺纤维化微循环障碍、改善受累肺组织纤维化病理表现、抗凝等方面减轻肺组织纤维化程度,仙灵脾联合仙茅作为温补肾阳法的代表药对,相较于仙灵脾单药、仙茅单药、单纯强的松效果更为显着,其温补肾阳功效更甚,更有利于肺纤维化的治疗。
王娟[8]（2020）在《自拟化痰逐瘀汤治疗特发性肺间质纤维化痰瘀互结证的临床疗效观察》文中进行了进一步梳理目的:本课题将通过对特发性肺间质纤维化中痰瘀互结证患者予以西药N-乙酰半胱氨酸泡腾片联合中药自拟化痰逐瘀汤颗粒剂治疗,观察患者中医症状及体征、肺功能（TLC、DLCO）、SpO2、HRCT等的影响,为今后临床治疗此疾病提供更多的思路与方法。方法:本文将把符合纳入标准的42例患者随机分为对照组和试验组,每组各21例患者。对照组给予单纯N-乙酰半胱氨酸泡腾片常规治疗,试验组则在N-乙酰半胱氨酸泡腾片治疗的基础上加以自拟化痰逐瘀汤口服（颗粒剂）,两组患者观察疗程均为12周,随后观察两组患者的中医症状积分、体征（Velcro啰音）、肺功能（TLC、DLCO）、SpO2、HRCT等指标的变化。结果:1.试验组与对照组两组患者的一般资料（年龄、性别、病程）、肺功能、HRCT、SpO2、中医症状及体征积分等相关指标无明显差异（P>0.05）,具有可比性。2.试验组治疗后症候积分、肺功能、HRCT总有效率为85.71%、85.71%、33.33%;相比较对照组的61.90%、80.95%、23.81%而言优于对照组。3.试验组与对照组治疗后症候积分、肺功能指标（TLC、DLCO）及SpO2水平均有明显差异（P<0.05）,且试验组优于对照组,而Velcro啰音比较、HRCT比较均无明显差异（P>0.05）,无统计学意义。4.组内比较试验组治疗前后症状积分、肺功能指标（TLC、DLCO）及SpO2水平均有明显差异（P<0.05）,而Velcro啰音、HRCT比较均无明显差异（P>0.05）;对照组治疗前后症状积分（咳嗽、咳痰、气短或气喘）、肺功能指标（TLC、DLCO）及SpO2水平均有明显差异（P<0.05）,而症状积分（全身困重、四肢乏力、大便性状改变、胸部刺痛、口干不欲饮等）、Velcro啰音、HRCT比较均无明显差异（P>0.05）。结论:自拟化痰逐瘀汤联合N-乙酰半胱氨酸泡腾片治疗特发性肺间质纤维化（痰瘀互结证）能明显改善患者的临床症状及相关指标,但不能引起患者肺部影像学的变化,考虑观察疗程短,治疗方案在改善患者肺部影像学方面尚未发挥作用,然而联合用药治疗的总有效率明显高于单纯西药治疗的总有效率。
柯诗文[9]（2020）在《温肺化纤汤对氧化应激环境下小鼠肺间充质干细胞线粒体质量的调控及分子机制初探》文中提出1 目的基于国医大师洪广祥“治肺不远温”学术思想,深入探讨“全程温法治疗肺间质纤维化”之代表专方温肺化纤汤的理论脉络和临床经验。在小鼠肺间充质干细胞线粒体形态学改变的微观发现基础上,结合中医“温阳扶正”之宏观理论,应用相关实验技术,初步探究温肺化纤汤对氧化应激环境下小鼠肺间充质干细胞线粒体质量的调控及其相应分子机制。2 方法2.1 理论探讨搜集并梳理亘古至今有关肺间质纤维化的经典文献,总结各大医家对肺间质纤维化的理论认识渊源和临证治则经验。阐述本团队对肺间质纤维化病因病机的探索过程,解释“全程温法治疗肺间质纤维化”的定义、原理及要点,展示团队代表性专方温肺化纤汤的药用和疗效;以调控线粒体质量为切入点,将线粒体微观之改变与中医宏观之理论对应融合。2.2 实验研究2.2.1 提取鉴定小鼠肺间充质干细胞（MLMSCs）并建立氧化应激模型分离C57BL/6小鼠肺组织,从中提取原代细胞,逐步传代纯化培养,通过镜下观察细胞形态、绘制细胞增殖曲线、流式技术分析细胞特征表型等方式以鉴定MLMSCs。使用H2O2（2000、1500、1000、800、600、400、200、100μM）作用细胞6h,经CCK8法检测细胞活力以建立模型。2.2.2 分组并观察温肺化纤汤对氧化应激下MLMSCs的影响使用CCK8法检测温肺化纤汤（2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625μg/m L）对健康MLMSCs和H2O2诱导的MLMSCs活力影响,确定科学的用药浓度并分组,设立NAC 5m M组作为阳性对照,检测对比各组细胞SOD活性、胞内ROS水平和细胞凋亡率。2.2.3 探讨温肺化纤汤对H2O2诱导的MLMSCs线粒体质量的调控流式细胞仪检测MLMSCs线粒体膜电位,酶标仪检测MLMSCs胞内ATP,透射电镜观察MLMSCs线粒体超微结构,RT-q PCR检测细胞线粒体动力学相关基因FIS1、MFN1、MFN2、DRP1、OPA1和PGC-1α的m RNA水平,Western blot检测MLMSCs线粒体自噬相关蛋白LC-3Ⅱ、Beclin-1和p62表达水平。2.2.4 初探温肺化纤汤调控MLMSCs线粒体质量的分子机制RT-qPCR技术检测MLMSCs中PINK1、Parkin的m RNA水平,Western blot检测MLMSCs线粒体PINK1、Parkin蛋白表达水平。3 结果3.1 理论探讨本文总结了中医对肺间质纤维化的认识演变过程,归纳了中医代表性治法及中药相关研究进展。在此基础之上,引出本团队治疗肺间质纤维化之观点,即“全程温法治疗肺纤维化”,通过对此观点及代表方温肺化纤汤的阐述、探讨,结合前期研究,将线粒体微观之改变与中医宏观理论对应融合,从“细胞之阳”角度,将线粒体、肺间充质干细胞、肺间质纤维化、温肺化纤汤、全程温法串联成一个完整的理念回路,为后续的实验研究奠定了坚实的理论依据。3.2 实验研究3.2.1 成功鉴定MLMSCs并确定氧化应激模型第10代MLMSCs镜下外观呈梭形,多以放射状排列,形态上趋于一致化,种植细胞24h后进入对数生长期,该期至少维持48h。表型鉴定结果:CD11b阳性表达率为3.01%,CD45表达率为2.79%,而CD44、CD54和Sca-1的阳性表达率分别为97.8%、95.2%、98.3%。MLMSCs免疫表型特征为CD11b阴性,CD45阴性,CD44阳性,CD54阳性,Sca-1阳性。氧化应激模型:选择600μM的H2O2作用MLMSCs持续6h,细胞存活率下降为对照组的59.8%（P<0.01）。3.2.2 温肺化纤汤对H2O2诱导的MLMSCs具有抗氧化保护作用经CCK8检测,浓度500μg/m L至15.625μg/m L范围内的温肺化纤汤对健康MLMSCs细胞活力的影响与对照组比不显着（P>0.05）;当浓度增加至1000、2000μg/m L,其影响具有差异（P<0.01）;针对H2O2诱导的MLMSCs,当温肺化纤汤浓度达到62.5μg/m L,对细胞活力影响与模型组比差异明显（P<0.05）;据上述结果选择500μg/m L和62.5μg/m L温肺化纤汤作为后续研究大小剂量组。造模后,细胞SOD水平降低（P<0.01）,胞内ROS水平升高（P<0.01）,细胞凋亡率提升显着（P<0.01）;温肺化纤汤组及NAC组均能提升SOD水平（P<0.01）,降低胞内ROS和细胞凋亡率（P<0.01）,500μg/m L温肺化纤汤组的逆转效果均较NAC组更好（P<0.01）。3.2.3 温肺化纤汤能调控H2O2诱导的MLMSCs线粒体质量造模后线粒体膜电位和ATP水平下降显着（P<0.01）,温肺化纤汤组及NAC组膜电位和ATP水平均提升（P<0.05）,500μg/m L温肺化纤汤组提升效果较NAC组更好（P<0.05）。经透射电镜观察,模型组线粒体呈畸形的长条状,嵴疏松、断裂,基质密度不均匀;NAC组和62.5μg/m L温肺化纤汤组中的线粒体仍异常明显,但能分辨线粒体嵴;500μg/m L温肺化纤汤组线粒体形态大多接近椭圆形,可见较为清晰的线粒体嵴和膜;此外,温肺化纤汤组中可见自噬小体。模型组细胞FIS1、MFN1、MFN2、DRP1、OPA1和PGC-1α的m RNA水平均有下降（P<0.01）,在500μg/m L温肺化纤汤组中FIS1、MFN1、MFN2和PGC-1α的m RNA水平较模型组显着上升（P<0.01）,DRP1有所提高（P<0.05）,OPA1差异不明显（P<0.05）。与模型组相比,500μg/m L温肺化纤汤组中LC-3Ⅱ和p62蛋白表达显着上升（P<0.01）,Beclin-1表达略提高（P<0.05）。3.2.4 温肺化纤汤可能经PINK1/Parkin通路调控MLMSCs线粒体质量造模后细胞PINK1、Parkin的m RNA水平下降（P<0.01）,温肺化纤汤组中上述m RNA水平上升（P<0.01）。与对照组相比,模型组线粒体PINK1蛋白表达升高、Parkin表达下降（P<0.05）,温肺化纤汤组中上述蛋白表达均较模型组升高（P<0.05）。4 结论温肺化纤汤可以调控小鼠肺间充质干细胞线粒体质量以发挥抗氧化保护作用,其机制可能与激活PINK1/Parkin信号通路相关。
史雨宸[10]（2020）在《基于“干血”理论对血瘀证肺间质纤维化患者临床特征规律的研究》文中进行了进一步梳理目的对肺间质纤维化的干血理论假说进行预探索,通过理论研究归纳形成肺间质纤维化干血判断标准假说,通过采集、分析血瘀证肺间质纤维化患者的临床资料,验证血瘀程度与肺间质纤维化患者病情严重程度的关系;并对干血判断标准内容进行检验,探求“血瘀”和“干血”的联系与区别以及“干血”对肺间质纤维化的特殊意义。背景肺间质纤维化的发病率和死亡率在全球范围内不断升高,危害人类健康。中医药对本病具有独到的见解和明确的疗效,不少医家认为肺络瘀阻是其病机关键之一,基于以上认识,我们提出肺间质纤维化的“干血”假说,认为本病患者的肺络瘀血与仲景所述之“干血”具有共通的特点,后者可能由前者发展而来。方法采用横断面临床流行病学调查的方式,纳入同时符合肺间质纤维化诊断及中医血瘀证诊断的患者,采集其一般信息、主要症状情况、中医四诊信息、生活质量评分、HRCT半定量评分和肺功能指标,采用描述性统计、卡方检验、因子分析和聚类分析、相关性分析等统计学方法,分析血瘀证肺间质纤维化患者中西医临床特点的分布情况和规律;分析血瘀程度与病情严重程度的相关性;通过理论研究,初步归纳肺间质纤维化患者的干血判断标准假说;运用对干血判断标准假说中各要素与病情的相关性分析验证假说。结果1.血瘀证肺间质纤维化患者发病男性多于女性,多发于老年,集中在51～80岁年龄段,其合并疾病以循环系统、自身免疫系统、呼吸系统、内分泌系统多见。2.咳嗽、咯痰、气短、喘息四项主要症状均广泛出现在血瘀证肺间质纤维化患者中,且多为合并出现;此外倦怠乏力、口干、胸闷、纳差等症状,缓久起病、症状运动/劳累后发作等特点,弦、细、滑等脉象以及舌质暗红苔白腻的舌象出现较多。3.脾虚湿阻,阳气不振兼有血瘀;肺肾两虚,气虚血瘀;肺脾两虚,气阴不足,痰瘀内阻为血瘀证肺间质纤维化患者的主要中医证型。中医证素辨证分析可知肺、肾、脾、气虚、阳虚、痰、血瘀、气滞等为常见的证素,其中肺、心病位,痰饮、血瘀和气虚、血虚、阴虚、阳虚与病情严重程度关系密切;肾、脾、心、肺、胃的病位,痰、气滞和阳虚、阴虚、血虚与血瘀证程度关系密切。4.肺间质纤维化患者的血瘀严重程度与咳嗽、咯痰、气短、喘息的主要症状、生活质量和HRCT半定量评分的相关性有统计学意义。5.通过理论研究初步归纳肺间质纤维化患者的干血判断标准假说为:（1）辨证符合血瘀证辨证;（2）辨证存在虚性因素;（3）辨证存在热性因素;（4）病位存在络脉因素;（5）病程长,经治疗（中医活血化瘀治疗）症状改善不满意;（7）具备以下症状或体征:1)肌肤甲错2)眼周黯黑3)腹满或腹痛4)纳差5)消瘦6)胸闷或胸痛。且以上因素的出现、发展、治疗改善应与肺间质纤维化主病的病情相关。6.通过与病情严重程度的相关性分析验证干血判断标准假说,其中虚证（包括气虚、阳虚、血虚、精亏）、久病和肌肤甲错、纳差、眼周黯黑等要素与病情严重程度具有相关性。结论文献整理和理论探讨表明,肺间质纤维化患者的瘀血与“干血”有密切关系。通过对血瘀证肺间质纤维化患者的临床特征的统计分析,发现虚、痰、瘀是其中医病机的关键,血瘀证程度与病情严重程度呈正相关,符合血瘀证是肺间质纤维化患者主要病理因素的假说。在干血的判断标准假说中,虚证、久病、肌肤甲错、纳差、眼周黯黑等要素与患者病情严重程度具有相关性,对判断肺间质纤维化患者的干血情况具有指导意义。
二、肺间质纤维化治疗的实验和临床研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、肺间质纤维化治疗的实验和临床研究进展（论文提纲范文）
（1）五味子乙素对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 一 特发性肺间质纤维化中医研究进展 |
| 1. 特发性纤维化中医诊断 |
| 2. “肺痹”古代认识 |
| 3. “肺痹”病因病机认识 |
| 4. “肺痹”中医防治 |
| 5. 小结 |
| 参考文献 |
| 二 特发性肺纤维化现代医学研究进展 |
| 1. 发病机制 |
| 2. 治疗进展 |
| 3. 小结 |
| 参考文献 |
| 三 五味子乙素研究进展及现代应用 |
| 1. 五味子药理作用及临床应用 |
| 2. 五味子乙素药理作用研究 |
| 3. 五味子乙素药理研究应用 |
| 4. 五味子乙素防治纤维化进展 |
| 5. 小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 实验部分 五味子乙素对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用 |
| 前言 |
| 1. 实验材料 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 标本采集及指标检测 |
| 4. 结果 |
| 5. 讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
| 在学期间研究成果 |
（2）肺纤维化的六经辨证研究及大黄（？）虫丸干预肺纤维化大鼠的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 综述研究 |
| 综述一 特发性肺纤维化的研究进展 |
| 1 病因 |
| 1.1 吸烟 |
| 1.2 遗传倾向 |
| 1.3 环境及职业暴露 |
| 1.4 胃食管反流 |
| 1.5 其他 |
| 2 发病机制 |
| 2.1 IPF的发病机制 |
| 2.2 TGF-β1/Smad3信号通路在IPF形成过程中的作用 |
| 3 诊断 |
| 3.1 临床表现 |
| 3.2 胸部HRCT |
| 3.3 肺组织病理 |
| 3.4 诊断标准 |
| 3.5 诊断流程 |
| 4 治疗 |
| 4.1 非药物疗法 |
| 4.2 药物疗法 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 肺纤维化的中医认识 |
| 1 肺纤维化的中医病名认识 |
| 1.1 病名源流 |
| 1.2 肺疾论 |
| 1.3 肺痹论 |
| 1.4 痿、痹并重 |
| 2 肺纤维化的辨证论治 |
| 2.1 正气虚衰为肺纤维化的发病根本 |
| 2.2 痰浊、瘀血、毒邪均为本病的病理因素 |
| 2.3 肺络是肺纤维化的关键病位 |
| 2.4 分期论治肺纤维化 |
| 2.5 六经与肺纤维化 |
| 3 大黄(?)虫丸与肺纤维化 |
| 3.1 大黄(?)虫丸的方义 |
| 3.2 血瘀兼证与肺纤维化 |
| 3.3 大黄(?)虫丸治疗肺纤维化的实验研究进展 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1 资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 信息采集 |
| 2.2 六经辨证分型标准 |
| 2.3 血瘀证诊断、量化标准 |
| 2.4 主要症状分级标准 |
| 2.5 统计方法 |
| 3 研究结果 |
| 3.1 一般资料 |
| 3.2 症状特点 |
| 3.3 舌脉特点 |
| 3.4 评分指标 |
| 3.5 肺纤维化肺六经辨证分布 |
| 3.6 六经与病情的相关性分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 研究结果讨论 |
| 4.2 肺纤维化、少阳三焦及“干血”之间的关系探讨 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 |
| 实验一 大黄(?)虫丸对博来霉素致肺纤维化大鼠肺功能及生存状态的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要药物与仪器 |
| 1.3 动物分组与造模 |
| 1.4 给药方法 |
| 1.5 肺功能检测 |
| 1.6 肺组织病理 |
| 1.7 统计方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般情况 |
| 2.2 体重变化 |
| 2.3 死亡率 |
| 2.4 肺功能 |
| 2.5 肺组织病理 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 大黄(?)虫丸对博来霉素致肺纤维化大鼠TGF-β1/Smad3信号通路的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物及分组 |
| 1.2 药物及试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 造模与给药方法 |
| 1.5 标本采集 |
| 1.6 肺组织病理 |
| 1.7 RT-PCR法检测TGF-β1、Smad3及Collagen Ⅰ相关基因表达 |
| 1.8 Western blot法检测Smad3, p-smad3蛋白表达 |
| 1.9 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 博来霉素致肺纤维化大鼠肺组织病理 |
| 2.2 RT-PCR法测TGF-β1、Smad3及Collagen Ⅰ相关基因表达 |
| 2.3 Western blot法测Smad3,p-smad3蛋白表达 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 不足与展望 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 附录1 血瘀兼证诊断及量化标准 |
| 附录2 肺纤维化中临床特征信息调查表 |
| 个人简介 |
（3）“党参平肺活血汤”治疗肺间质纤维化气阴两虚夹瘀证的临床疗效观察（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1 中医学对肺间质纤维化的认识 |
| 1.1 病名及沿革 |
| 1.2 病因病机分析 |
| 1.3 辨证论治经验 |
| 1.4 临床用药规律 |
| 2 西医学对肺间质纤维化的认识 |
| 2.1 流行病学 |
| 2.2 发病机制 |
| 2.3 诊断标准 |
| 2.4 治疗进展 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1 临床资料 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 西医诊断标准 |
| 1.4 中医诊断标准 |
| 1.5 排除标准 |
| 1.6 剔除标准 |
| 1.7 脱落标准及脱落病例的处理 |
| 1.8 终止试验标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 研究类型 |
| 2.2 治疗方案 |
| 2.3 观察指标 |
| 3 统计方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 一般性资料 |
| 4.2 疗效性评价 |
| 4.3 安全性评价 |
| 第三部分 讨论 |
| 1 立题背景 |
| 2 “党参平肺活血汤”选方依据 |
| 2.1 方药来源 |
| 2.2 方药组成 |
| 2.3 组方分析 |
| 3 研究结果分析 |
| 3.1 党参平肺活血汤对肺间质纤维化患者中医症候积分的影响 |
| 3.2 党参平肺活血汤对肺间质纤维化患者圣乔治呼吸问卷评分的影响 |
| 3.3 党参平肺活血汤对肺间质纤维化患者6分钟步行距离与SPO_2%的影响 |
| 3.4 党参平肺活血汤对肺间质纤维化患者肺功能的影响 |
| 3.5 党参平肺活血汤的安全性分析 |
| 第四部分 结论与展望 |
| 1 结论 |
| 2 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 1 中医症候积分量表 |
| 2 圣乔治呼吸问卷 |
| 3 缩略词 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（4）肺纤维化大鼠全转录组测序分析及加味补阳还五汤调控Notch/Jagged通路抗纤维化的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 理论研究 |
| (一)“益气温阳活血”探讨加味补阳还五汤治疗肺纤维化 |
| 1.病因病机 |
| 2.治疗方法 |
| 3.方药解析 |
| 4.研究进展 |
| 5.小结 |
| 参考文献 |
| (二)益气温阳活血中药基于Notch/jagged信号通路调节肺纤维化 |
| 1.Notch信号通路 |
| 2.Notch/jagged1 信号通路与肺纤维化 |
| 3.气虚血瘀型肺纤维化的中医治疗 |
| 4.补阳还五汤通过Notch/jagged1 信号通路改善肺纤维化 |
| 参考文献 |
| (三)活血化瘀药联合西医治疗间质性肺疾病临床研究文献的Meta分析 |
| 1.资料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.总结 |
| 参考文献 |
| (四)非编码RNA在肺纤维化中的研究进展 |
| 1.lncRNA与肺纤维化 |
| 2.miRNA与肺纤维化 |
| 3.circRNA与肺纤维化 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 主要材料与试剂 |
| 研究对象 |
| 实验主要试剂与耗材 |
| 实验仪器与设备 |
| 实验药物 |
| (一)肺纤维化大鼠全转录组高通量测序分析 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 参考文献 |
| (二)加味补阳还五汤对肺纤维化大鼠肺组织病理形态的实验观察 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.实验结果及分析 |
| 4.结论 |
| (三)加味补阳还五汤干预Notch信号通路对MRC-5 细胞的调节机制 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.统计学分析 |
| 4.实验结果 |
| 5.实验结论 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 附件 |
（5）基于血管新生机制探讨miR-126对肺纤维化大鼠VEGF调控及加味补阳还五汤的干预作用（论文提纲范文）
| 提要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 理论探讨 |
| 1 中医学对肺纤维化的认识 |
| 1.1 病名探究 |
| 1.2 病因病机浅析 |
| 1.3 中医辨证论治 |
| 2 现代医学对特发性肺纤维化的认识 |
| 2.1 特发性肺纤维化的病因及发病机制 |
| 2.2 血管新生在特发性肺纤维发病中的作用 |
| 2.3 特发性肺纤维化的西医治疗现状 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1 加味补阳还五汤对肺纤维化大鼠肺组织形态学、mi R-126、VEGF及 HIF-1α的影响 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 结论 |
| 2 TGF-β1 诱导的MRC-5中mi R-126 转染对VEGF的影响 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 结论 |
| 3 加味补阳还五汤含药血清对TGF-β1 诱导的MRC-5 mi R-126、VEGF及 HIF-1α的影响 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 结论 |
| 讨论 |
| 1 导师治疗肺纤维化学术思想浅析 |
| 1.1 气运失常 |
| 1.2 血运失常 |
| 1.3 肺络痹阻 |
| 2 加味补阳还五汤组方配伍及研究 |
| 3 疗效分析 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 VEGF 在肺纤维化中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 中英文缩略词 |
| 致谢 |
| 科技查新 |
| 发表论文 |
| 附件 |
（6）淫羊藿苷调控VEGF相关信号通路干预血管新生的作用及临床研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 临床研究 |
| 一、肺纤维化治疗经验总结及验方概述 |
| (一) 经验总结 |
| (二) 验方概述 |
| 二、临床病案分析 |
| (一) 间质肺纤饮加味、培元啸天饮治疗间质性肺炎“痰瘀阻络,肺肾阳虚”证 |
| (二) 补阳还五汤加味治疗间质性肺炎 |
| 第二部分 理论研究 |
| 一、中医学对肺纤维化的认识 |
| (一) 病名 |
| (二) 病因病机 |
| 二、中医学肺肾相关理论基础 |
| (一) 金水相生、阴阳互滋 |
| (二) 共同参与调控呼吸运动及气血津液代谢 |
| (三) 肺肾经气相通 |
| 三、肾阳虚在肺纤维化病机演变中的意义 |
| (一) 肾阳虚贯穿肺纤维化各个阶段 |
| (二) 肾阳虚与痰、瘀形成的关系 |
| 四、从肾阳虚论治肺纤维化的研究概况 |
| 五、血管新生及VEGF在肺纤维化发展中的作用及机制研究 |
| 六、中药单体淫羊蕾苷的相关研究 |
| 第三部分 实验研究 |
| 一、实验材料 |
| (一) 实验细胞 |
| (二) 主要实验试剂和耗材 |
| (三) 主要实验仪器和设备 |
| 二、实验方案 |
| (一) 淫羊藿苷对肺微血管内皮细胞增殖的影响 |
| (二) 淫羊藿苷对肺微血管内皮细胞迁移的影响 |
| (三) 淫羊藿苷对肺微血管细胞分泌VEGF的影响 |
| (四) Real time-PCR检测VEGF基因表达 |
| (五) Western blot检测蛋白表达 |
| 三、统计学处理方法 |
| 四、实验结果 |
| (一) 淫羊藿苷对肺微血管内皮细胞增殖的影响 |
| (二) 淫羊藿苷抑制肺微血管内皮细胞血管新生 |
| (三) 淫羊藿苷抑制肺微血管内皮细胞血管新生分子机制 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 中药干预肺纤维化分子治疗靶点的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 发表论文 |
（7）温补肾阳法干预肺纤维化大鼠PEDF、bFGF表达的实验研究及临床分析（论文提纲范文）
| 提要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 临床分析 |
| 一、病例选择 |
| 二、诊断标准 |
| (一)西医诊断标准 |
| (二)中医证候诊断标准 |
| 三、纳入标准 |
| 四、排除标准 |
| 五、病例选择结果 |
| 六、数据处理 |
| (一)建立原始资料库 |
| (二)统计分析 |
| (三)结果 |
| 讨论 |
| 一、祖国医学对肺纤维化的认识 |
| 二、温补肾阳法相关研究 |
| (一)肺肾相关理论 |
| (二)相关临床研究 |
| 三、临床数据分析 |
| (一)年龄分布规律 |
| (二)药物频次分析 |
| (三)药物分类频率频数分析 |
| (四)药物性味归经频率频数分析 |
| 第二部分 动物实验研究 |
| 一、实验思路 |
| 二、动物实验 |
| (一)实验材料 |
| (二)实验方法 |
| (三)标本采集与指标检测 |
| (四)统计处理 |
| (五)实验结果 |
| 讨论 |
| 一、仙茅、仙灵脾的相关研究 |
| (一)仙灵脾 |
| (二)仙茅 |
| (三)仙灵脾与仙茅药对 |
| 二、仙茅、仙灵脾对本实验相关细胞因子的影响及探讨 |
| (一)肺纤维化血管新生 |
| (二)色素上皮衍生因子(PEDF) |
| (三)碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) |
| (四)微血管密度(microvessel density,MVD) |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 温补肾阳类中药治疗肺纤维化的相关研究 |
| 参考文献 |
| 附录 |
（8）自拟化痰逐瘀汤治疗特发性肺间质纤维化痰瘀互结证的临床疗效观察（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词 |
| 前言 |
| 1.资料 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 中止观察标准 |
| 1.6 中止观察病例的处理 |
| 2.方法 |
| 2.1 分组方法 |
| 2.2 治疗方法 |
| 2.3 观察指标 |
| 2.4 疗效评定标准 |
| 2.5 统计方法 |
| 3.结果 |
| 3.1 一般资料可行性分析 |
| 3.2 疗效指标分析 |
| 3.3 不良反应安全性分析 |
| 4.讨论 |
| 4.1 现代医学对特发性肺间质纤维化的认识 |
| 4.2 祖国医学对特发性肺间质纤维化的认识 |
| 4.3 选方依据 |
| 4.4 临床观察疗效分析 |
| 5.存在问题与展望 |
| 6.结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（9）温肺化纤汤对氧化应激环境下小鼠肺间充质干细胞线粒体质量的调控及分子机制初探（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一章 理论探讨 |
| 第一节 肺纤维化的中医中药研究概述 |
| 1 古代医家对肺纤维化的认识 |
| 2 现代医家对肺纤维化病因病机的看法 |
| 3 中医各家治疗肺纤维化之代表性观点 |
| 4 现代中医中药治疗肺纤维化之进展 |
| 第二节 “全程温法治疗肺纤维化”的理论依据与临床应用 |
| 1 温法治之,古有先例 |
| 2 基于传承,治不远温 |
| 3 探究创新,温当全程 |
| 4 温肺化纤,专方治疗 |
| 5 一方广用,助战疫情 |
| 6 案例举隅 |
| 第三节 从间充质干细胞线粒体角度论“全程温法治疗肺纤维化” |
| 1 细胞之“阳”:线粒体 |
| 2 修复之“祖”:干细胞 |
| 3 论病之“性”:纤维化 |
| 4 温阳之“法”:全程性 |
| 5 结语与展望 |
| 第四节 线粒体质量调控机制的研究概述 |
| 1 抗氧化是线粒体质量调控的初级防线 |
| 2 线粒体融合分裂是线粒体质量调控的基础手段 |
| 3 线粒体自噬是线粒体质量调控的清理环节 |
| 4 线粒体生物合成是线粒体质量调控的后勤保障 |
| 5 线粒体质量调控与PINK1/Parkin通路 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 提取鉴定小鼠肺间充质干细胞及氧化应激模型的建立 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二节 温肺化纤汤对H_2O_2诱导的MLMSCs氧化应激的保护作用 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三节 温肺化纤汤对H_2O_2诱导的MLMSCs线粒体质量的调控 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四节 温肺化纤汤调控MLMSCs线粒体质量的机制初探 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三章 结论与创新点 |
| 参考文献 |
| 综述 间充质干细胞来源的外泌体:中医药治疗肺病新视角 |
| 综述参考文献 |
| 答辩委员会名单 |
| 作者简介 |
（10）基于“干血”理论对血瘀证肺间质纤维化患者临床特征规律的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 特发性肺间质纤维化的现代医学研究进展 |
| 1.定义 |
| 2.流行病学 |
| 3.自然史 |
| 4.病因与危险因素 |
| 5.发病机制 |
| 6.诊断与评估 |
| 7.治疗进展 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 肺间质纤维化的中医研究进展 |
| 1.古代中医源流 |
| 2.现代中医认识 |
| 3.中医研究进展 |
| 4.血瘀证肺间质纤维化的研究现况 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 临床研究 |
| 1.研究方法 |
| 1.1 研究目的 |
| 1.2 研究对象 |
| 1.3 研究标准 |
| 2.研究方法 |
| 2.1 制定血瘀证肺间质纤维化患者的临床信息采集表 |
| 2.2 采集临床信息资料 |
| 2.3 数据处理与统计分析 |
| 3.研究结果 |
| 3.1 一般情况分布 |
| 3.2 证候学分析 |
| 3.3 血瘀证与病情的相关性分析 |
| 3.4 干血判断要素的验证分析 |
| 4.讨论 |
| 4.1 干血的理论探讨 |
| 4.2 研究结果讨论 |
| 4.3 创新性分析 |
| 4.4 不足与展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1: 血瘀证肺间质纤维化患者临床信息采集表核心内容 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
四、肺间质纤维化治疗的实验和临床研究进展（论文参考文献）
- [1]五味子乙素对博来霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用及机制研究[D]. 赵红舟. 北京中医药大学, 2021(08)
- [2]肺纤维化的六经辨证研究及大黄（？）虫丸干预肺纤维化大鼠的实验研究[D]. 蔡松. 北京中医药大学, 2021(08)
- [3]“党参平肺活血汤”治疗肺间质纤维化气阴两虚夹瘀证的临床疗效观察[D]. 章莉. 南京中医药大学, 2021(01)
- [4]肺纤维化大鼠全转录组测序分析及加味补阳还五汤调控Notch/Jagged通路抗纤维化的机制研究[D]. 刘学. 山东中医药大学, 2020(01)
- [5]基于血管新生机制探讨miR-126对肺纤维化大鼠VEGF调控及加味补阳还五汤的干预作用[D]. 田丽. 山东中医药大学, 2020(01)
- [6]淫羊藿苷调控VEGF相关信号通路干预血管新生的作用及临床研究[D]. 李芊芊. 山东中医药大学, 2020(01)
- [7]温补肾阳法干预肺纤维化大鼠PEDF、bFGF表达的实验研究及临床分析[D]. 李斐然. 山东中医药大学, 2020(01)
- [8]自拟化痰逐瘀汤治疗特发性肺间质纤维化痰瘀互结证的临床疗效观察[D]. 王娟. 山西中医药大学, 2020(07)
- [9]温肺化纤汤对氧化应激环境下小鼠肺间充质干细胞线粒体质量的调控及分子机制初探[D]. 柯诗文. 江西中医药大学, 2020(01)
- [10]基于“干血”理论对血瘀证肺间质纤维化患者临床特征规律的研究[D]. 史雨宸. 北京中医药大学, 2020(04)