一、中枢学习记忆功能与环磷酸腺苷反应单元结合蛋白的关系（论文文献综述）
王睿,吴睦霖,王伟,邢宇双,徐天娇,王琪,张宁[1]（2021）在《环磷酸腺苷反应元件结合蛋白-脑源性神经营养因子信号通路功能低下与抑郁症》文中进行了进一步梳理抑郁症为心境障碍的主要类型,因高患病率、高复发率、高自杀率等特点成为严重影响人类健康的公共卫生及社会问题,但发病机制不详。"海马神经可塑性障碍"为新近有关抑郁症发病神经生物学机制研究热点。CREB（环磷酸腺苷反应元件结合蛋白）-BDNF（脑源性神经营养因子）/TrkB（酪氨酸激酶受体B）信号通路是神经再生关键环路之一,该信号通路相关蛋白表达与抑郁症发生、发展关系密切,阐明该通路信号功能将为探索抑郁症神经生物学病因提供必要信息,并为临床开发靶点明确抗抑郁创新药物提供理论基础。
刘玥欣[2]（2021）在《基于PI3K/AKT信号通路探讨鹿茸多肽改善轻度认知功能障碍的作用机制研究》文中指出目的:本研究基于PI3K/AKT信号通路探讨鹿茸多肽（Velvet antler peptide,VAP）对神经元修复及保护作用,阐释VAP改善轻度认知功能障碍（Mild Cognitive Impairment,MCI）作用机制,为临床鹿茸防治MCI提供依据。方法:本研究利用体内、体外实验,探讨VAP通过调控PI3K/AKT信号通路改善MCI作用机制。1 VAP鉴定及检测利用双缩脲法鉴定VAP理化性质;利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳实验（SDSPolyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）测定VAP分子量;利用柱前衍生化-高效液相色谱法（Precolumn derivatization-High performance liquid chromatography,PD-HPLC）测定VAP不同成分含量。2基于网络药理学探讨鹿茸改善MCI的作用机制利用TCMID数据库、Pubchem数据库筛选鹿茸活性成分及靶点;利用OMIM数据库、Disgenet数据库、Genecards数据库筛选MCI作用靶点;利用Venny 2.1在线作图工具平台筛选鹿茸-MCI作用靶点;利用STRING 11.0蛋白质互作平台构建蛋白-蛋白相互作用（Protein-protein interaction,PPI）网络,利用Cytoscape 3.8.0网络拓扑属性分析软件,基于拓扑分析、聚类分析筛选PPI网络核心靶点;利用Cytoscape 3.8.0网络拓扑属性分析软件构建“中药-成分-靶点-疾病”网络模型,分析核心成分;利用R语言及Bioconductor生物信息软件,进行基因本体论（Gene ontology,GO）富集分析以及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）富集分析,对共同靶点所涉及的生物学过程、主要代谢通路等进行归纳。3基于PI3K/AKT信号通路探讨VAP改善不同MCI模型大鼠认知功能障碍的作用机制采用腹腔注射东莨菪碱法、单侧颈总动脉结扎法分别诱导不同MCI大鼠模型。利用旷场实验、Morris水迷宫实验观察VAP对不同MCI模型大鼠行为学变化的影响;利用苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-eosin staining,HE）观察VAP对不同MCI模型大鼠海马区病理学变化的影响;利用ELISA检测VAP对不同MCI模型大鼠血清中SOD、MDA、脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factor,BDNF）、神经生长因子（Nerve growth factor,NGF）、血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）、睾酮（Testosterone,T）、皮质醇（Cortisol）含量变化的影响;利用Western Blot检测VAP对不同MCI模型大鼠海马区PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平的影响。4基于代谢组学分析VAP改善MCI模型大鼠认知功能障碍的作用机制利用超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间二级质谱联用（UPLC-Q/TOF-MS）代谢组学技术对由腹腔注射东莨菪碱法复制的MCI模型大鼠脑组织、肾脏进行检测,分析各组间差异代谢物、代谢通路动态变化情况。5基于PI3K/AKT信号通路探讨VAP拮抗由冈田酸（Okadaic acid,OA）诱导的受损HT22细胞的作用机制利用OA诱导HT22细胞损伤建立模型,给药后,利用CCK-8法检测HT22细胞活性,WST-1法、可分光光度法检测HT22细胞中超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-PX）活力或含量变化的影响,Western Blot检测HT22细胞中PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达水平。结果:1 VAP鉴定及检测实验中选用的VAP理化性质为蛋白质,分子量约为3.2k Da,由17种氨基酸组成,其中必须氨基酸共有7种,含量为393.39±1.65g/kg,氨基酸总含量为826.55±10.75g/kg,不同成分含量稳定,可用于本实验研究。2基于网络药理学探讨鹿茸改善MCI的作用机制鹿茸中多数活性成分为VAP中的重要构建物质,利用交互网络发现鹿茸活性成分可能通过PI3K/AKT信号通路发挥改善MCI作用,作用机制可能与调控体内神经信号转导、神经元损伤、氧化应激过程、性激素类作用等途径相关,为本研究探讨VAP对MCI的改善作用提供方法与思路。3基于PI3K/AKT信号通路探讨VAP改善不同MCI模型大鼠认知功能障碍的作用机制VAP能够提高不同MCI模型大鼠学习、记忆能力,改善海马区固缩现象,增加不同MCI模型大鼠血清中SOD、BDNF、NGF、VEGF、T、Cortisol含量（P<0.05或P<0.01）,减少MDA含量（P<0.05或P<0.01）,升高Bcl-2、m TOR表达水平（P<0.05或P<0.01）,降低Bad、Bax、Caspase-3蛋白表达水平（P<0.05或P<0.01）,上调PI3K/AKT信号通路的表达（P<0.05或P<0.01）。4基于代谢组学分析VAP改善MCI模型大鼠认知功能障碍的作用机制VAP改善MCI模型大鼠认知功能障碍作用机制可能与调控脑内叶酸及脂质代谢、环磷酸腺苷能量循环、氨基酸生物合成,以及肾脏中性激素分泌等多种途径相关。5基于PI3K/AKT信号通路探讨VAP拮抗由冈田酸（Okadaic acid,OA）诱导的受损HT22细胞的作用机制VAP能够提高受损HT22细胞存活率（P<0.01）,增强受损HT22细胞中SOD、GSH-PX活力（P<0.01）,减少MDA含量（P<0.01）,降低Bad、Bax、Caspase-3蛋白表达水平（P<0.01）,上调PI3K/AKT信号通路的表达（P<0.01）。结论:VAP可能通过“填精补髓”作用调控PI3K/AKT信号通路,拮抗由OA诱导的受损HT22细胞,并提高不同MCI模型大鼠学习、记忆能力,调节肾脏功能、促进神经元细胞生长、增殖与分化,保护中枢神经系统,作用机制可能与调控脑内叶酸及脂质代谢、环磷酸腺苷能量循环、氨基酸生物合成,以及肾脏中性激素分泌等多种途径相关。
韩琦[3]（2021）在《基于“肝应春，主疏泄、调节情志”研究松果腺在四季调节海马功能的机制》文中进行了进一步梳理“五藏应时”理论源于《黄帝内经》“天人相应”思想,是中医藏象理论的重要组成部分。基于“五藏应时”的“肝应春”理论,“肝主疏泄,调节情志”的功能具有应四时阴阳消长变化而变化的节律。关于“肝主疏泄、调节情志,应时而变”现代科学内涵的研究已经发现了其与松果腺-褪黑素（Melatonin,MT）四季调控海马功能的相关性。课题组的前期研究发现,松果腺-MT在四季调节海马单胺类神经递质的表达,这与“肝主疏泄,调节情志”功能在四季的季节性改变相关。但是,目前关于松果腺-MT在四季调控海马功能的细胞信号转导机制尚不明晰。因此,本研究拟将“肝主疏泄、调节情志,应时而变”理论与神经内分泌细胞信号转导机制相结合,进一步揭示“肝主疏泄、调节情志,应时而变”的科学内涵。从“五藏应时”的角度丰富中医肝藏象与时间医学的理论内涵,并为精神情志疾病的临床防治提供理论与实验依据。1目的结合“五藏应时”理论与神经细胞信号转导机制,研究四季时间节律对松果腺-MT-海马褪黑素受体（Melatonin receptor,MTR）及Gs/Gi-海马环磷酸腺苷（Cyclic adenosine monophosphate,cAMP）-蛋白激酶A（Protein kinase A,PKA）-环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（cAMP-response element binding protein,CREB）信号通路的影响,揭示“肝主疏泄、调节情志,应时而变”的微观机制。2方法2.1理论研究采用文献梳理以及理论探讨法,搜集、归纳整理“肝主疏泄、调节情志,应时而变”、松果腺-MT、海马MTR及Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路的理论与实验研究,探讨“肝主疏泄、调节情志,应时而变”的神经细胞信号转导机制及科学内涵。2.2实验研究2.2.1实验设计基于二分二至的时间节点,以5周龄的SD雄性大鼠为实验对象,以血清MT、海马 MTR、Gs 蛋白、Gi 蛋白、腺苷酸环化酶（Adenylate cyclase,AC）、cAMP、PKA、CREB为检测指标,研究四季生理组、伪手术组、手术组大鼠松果腺-海马细胞信号转导的表达水平。通过分别比较同一组四季间及同一季节组间的表达差异,探讨四季时间节律及松果腺-MT对海马MTR-Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路的影响。2.2.2实验动物分别于春分、夏至、秋分、冬至日前42日各购入34只SPF级雄性SD大鼠,共计136只大鼠。大鼠的周龄及体重为5周龄、150-170g。各季节,经7日的适应性饲养后,按完全随机分组法将大鼠分为生理组（9只）、伪手术组（12只）、手术组（13只）。每组实验大鼠的数量基于前期实验研究大鼠手术操作的生存率约为75%。伪手术组、手术组的所有手术操作控制于5日内完成。三组大鼠在相同的饲养环境下进行饲养。分别在春分、夏至、秋分、冬至日晚进行大鼠取材工作。饲养环境:所有大鼠室内饲养;自然光照时长为春季10±1h,夏季14.5±0.5h,秋季13±1h,冬季9±0.5h;相对湿度为40%-50%。2.2.3指标检测方法采用酶联免疫吸附测定（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测血清MT以及海马MTR、AC、cAMP、PKA、CREB的表达;采用蛋白质印迹法（Western blot,WB）检测海马Gs、Gi的表达;采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应（Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR）检测 CREB mRNA 的表达。2.2.4统计方法所有数据均采用平均数±标准差（x±s）的形式展现。运用SPSS 24.0统计软件进行各指标数据的统计分析。对符合正态分布数据,采用单因素方差分析方法进行统计分析;对不符合正态分布数据,采用非参数检验的方法进行统计分析。P<0.05即被认为具有显着的统计学意义。3结果3.1生理组血清MT、海马MTR四季表达水平:血清MT、海马MTR的表达在四季存在冬>秋>春>夏的四季节律性（血清MT:P<0.01;海马MTR:P<0.05）。3.2生理组海马Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路四季表达水平:Gs/Gi在四季存在冬>秋>夏>春的四季节律性（P<0.01）;AC、cAMP、PKA、CREB、CREB mRNA的表达在四季存在冬>秋>春/夏的四季节律性（P<0.01）。3.3摘除松果腺对血清MT、海马MTR的影响:相较生理组,手术组血清MT、海马MTR四季表达节律转为冬>秋>春/夏春（P<0.01）;手术组四季血清MT、海马MTR的表达水平降低（P<0.01）。3.4摘除松果腺对海马Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路的影响:相较生理组,手术组Gs/Gi四季表达节律转为秋>冬>夏>春（P<0.01）;手术组AC、cAMP、PKA、CREB、CREB mRNA四季表达节律转为秋>冬>春/夏（P<0.01）;春季手术组Gs/Gi、AC、cAMP、PKA、CREB、CREB mRNA 的表达水平降低（Gs/Gi、AC、CREB mRNA:P<0.01;cAMP、PKA、CREB:P<0.05）;夏季手术组 AC、cAMP、PKA、CREB、CREB mRNA的表达水平降低（cAMP、PKA、CREB、CREB mRNA:P<0.01;AC:P<0.05）;秋季手术组 Gs/Gi、AC、cAMP、PKA、CREB、CREB mRNA 的表达水平降低（AC、cAMP、PKA、CREB、CREB mRNA:P<0.01;Gs/Gi:P<0.05）;冬季手术组Gs/Gi、AC、cAMP、PKA、CREB、CREB mRNA 的表达水平降低（P<0.01）。4结论4.1理论研究提出研究假说“肝主疏泄、调节情志,应时而变”的微观机制可能与松果腺-MT对海马MTR的直接调节作用相关,其调节作用的神经细胞信号转导机制可能与海马Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路具有相关性。4.2实验研究4.2.1血清MT、海马MTR以及海马Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路的表达具有一定的季节节律性,表现为春夏季较低、秋冬季较高。4.2.2松果腺-MT可能是四季节律调节海马功能的中介之一。4.2.3松果腺-MT对海马功能具有直接调控作用,其调控机制与海马MTR及Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路相关,且具有季节选择性、程度差异性、调控复杂性的调控特点。4.2.4“肝主疏泄、调节情志,应时而变”具有科学内涵,其微观机制可能与松果腺-MT-海马MTR以及Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路相关。
方琼[4]（2021）在《牛磺酸促进生长受限胎鼠近远期脑发育及机制研究》文中认为背景:胎儿生长受限（FGR）是导致患儿近期和远期神经发育障碍的主要原因之一。FGR脑发育近期损伤表现为脑内神经干细胞（NSC）增殖分化减少,细胞构成比、突触连接异常,脑代谢异常;远期为运动学习障碍,神经行为异常。胎儿NSC分化是脑发育基础,海马是学习认知关键部位。补充牛磺酸激活蛋白激酶A（PKA）-环磷酸腺苷反应结合蛋白（CREB）通路改善FGR胎脑发育,相关机制尚待深入研究;对远期海马神经细胞、代谢功能、突触发育、学习认知影响亦不明确。本研究建立FGR胎鼠NSC模型和幼鼠模型,采用分子生物、脑功能、行为学检测手段,探讨牛磺酸促进FGR胎脑NSC分化机制;研究其保护FGR幼鼠海马神经元,改善代谢水平;增加海马突触素（Syn）表达,促进幼鼠认知发育。方法:全程饥饿法建立FGR胎鼠模型,脑室管膜下区组织解离培养成神经球,分对照组、FGR组、牛磺酸组、H89（PKA抑制剂）组和牛磺酸+H89组。CCK8及细胞计数法检测NSC增殖力;免疫荧光法检测NSC分化神经元和星形胶质细胞;RT-PCR和Western blot（WB）检测分化细胞表达PKA、CREB和脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA及蛋白。建立FGR幼鼠模型,分对照组、FGR组、产前牛磺酸组（FGR孕鼠孕7天后补充至分娩）和生后牛磺酸组（FGR新生鼠生后补充14天）,MRS分析14天幼鼠海马细胞代谢特点;免疫组化和WB法观察海马区神经细胞组成。28天幼鼠行感觉运动能力测试,检测海马区Syn蛋白表达。结果:FGR组胎鼠NSC增殖分化能力低,分化Tuj-1（+）神经元比例低于对照组,GFAP（+）星形胶质细胞比例增高。牛磺酸提高分化NSC表达PKA、CREB、BDNF mRNA和蛋白,增加Tuj-1（+）神经元比例,降低GFAP（+）细胞比例。14天FGR幼鼠海马NAA/Cr和Gln/Cr、NeuN蛋白表达降低,Cho/Cr和mI/Cr、GFAP蛋白表达增高。产前补充牛磺酸,提高FGR幼鼠海马NAA/Cr、NeuN蛋白表达,接近对照组（p>0.05）,生后补充值低于对照组（p<0.05）。产前和生后补充均可降低FGR幼鼠海马Cho/Cr和mI/Cr、GFAP蛋白表达。海马区NAA/Cr与NeuN蛋白、mI/Cr与GFAP蛋白表达成正相关（p<0.05）。FGR组28天幼鼠悬吊、平衡木实验分数及海马区Syn蛋白表达降低,产前补充牛磺酸提高FGR幼鼠测试分及Syn蛋白表达,接近对照组（p>0.05）,生后补充值低于对照组（P<0.05）。功能学测试分数与海马区Syn蛋白表达呈正相关（p<0.05）。结论:牛磺酸激活PKA-CREB-BDNF信号通路促进FGR胎脑NSC增殖分化,改善神经元/胶质细胞比例。产前补充牛磺酸通过提高FGR幼鼠海马神经元/胶质细胞比例,改善海马代谢水平;同时,还能通过增加FGR幼鼠海马区Syn表达,促进突触发育,提高感觉运动能力,促进认知发育。
任小娟[5]（2020）在《肾不藏志不寐的理论及实验研究》文中指出目的:（1）探讨肾不藏志不寐论治的理论依据、因机证治和常用安肾志方药。（2）采用D-半乳糖联合对氯苯丙氨酸（PCPA）建立肾不藏志不寐大鼠模型,观察肾不藏志不寐模型大鼠衰老方面、睡眠方面和海马转录组变化,衰老方面包括记忆能力、氧化应激、凋亡基因,睡眠方面包括睡眠时间、脑电图、炎症因子和神经递质。（3）观察远志对肾不藏志不寐大鼠睡眠、神经递质和炎性因子的影响,以及远志对肾不藏志不寐大鼠海马转录组的影响。方方法:（1）收集、归纳和探讨肾不藏志不寐的理论依据和论治方药。（2）将实验动物随机分为空白对照组、D-半乳糖组、对氯苯丙氨酸组、肾不藏志不寐组,采用D-半乳糖120mg/kg/d皮下注射42d联合PCPA 300mg/kg/d腹腔注射3d建立肾不藏志不寐大鼠模型。（3）通过Morris水迷宫（MWM）观察肾不藏志不寐大鼠学习记忆能力,检测肾不藏志不寐大鼠脑氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）的含量,海马超氧化物歧化酶1（SOD1）、超氧化物歧化酶2（SOD2）、CAT、B淋巴细胞瘤相关X蛋白（Bax）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、半胱氨酸蛋白酶（Caspase-3）m RNA的表达,观察肾不藏志不寐大鼠衰老方面的变化。（4）采用戊巴比妥实验观察肾不藏志不寐大鼠睡眠情况,通过脑电图观察大鼠觉醒（Wake）、慢波睡眠I期（SWS1）、慢波睡眠II期（SWS2）、快速动眼睡眠（REMS）和睡眠总时间（TST）,检测肾不藏志不寐大鼠血浆白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量,脑5-羟色胺（5-HT）、谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）含量,海马白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、核转录因子-κB（NF-κB）、5羟色胺1A受体(5-HT1AR)、γ-氨基丁酸A受体α1亚型(GABAARα1)、代谢型谷氨酸受体2（m Glu R2）m RNA的表达,观察肾不藏志不寐大鼠进行睡眠方面的变化。（5）对空白对照组和肾不藏志不寐组大鼠海马提取总RNA进行转录组测序和分析。（6）观察远志对肾不藏志不寐大鼠的影响:将实验动物随机分为空白对照组、肾不藏志不寐组、远志低剂量组（0.0875g/kg）、远志中剂量组（0.175g/kg）、远志高剂量组（0.35g/kg）、地西泮组（0.92mg/kg）,通过MWM观察远志对肾不藏志不寐大鼠学习记忆能力的影响,检测各组大鼠海马5-HT、Glu、GABA的含量,血浆IL-1β、IL-6、TNF-α的含量。（7）对空白对照组、肾不藏志不寐组、远志中剂量组、地西泮组大鼠海马提取总RNA进行转录组测序和分析。结结果:（1）肾志对寐寤具有调节作用,肾不藏志不寐的主症为夜寐早寤,病位在肾,病因是肾脏虚损,肾志不入于舍是肾不藏志不寐的核心病机。肾不藏志不寐常见临床证型包括肾气不固型、肾精不足型、肾阳虚型、肾阴虚型、肾虚水泛型和肾不纳气型六种证型。远志、刺五加、人参、茯神、五味子、交泰丸、黄连阿胶汤、六味地黄丸、磁朱丸和孔圣枕中丹是治疗肾不藏志不寐常用方药。（2）D-半乳糖120mg/kg/d皮下注射42d联合PCPA 300mg/kg/d腹腔注射3d可以建立肾不藏志不寐大鼠模型。（3）肾不藏志不寐大鼠模型衰老方面的变化:与空白对照组比较,模型大鼠体重减轻,MWM中逃避潜伏期延长、穿台次数减少,脑SOD、CAT、GSH-px含量减少、MDA含量增加,海马SOD1、SOD2、CAT m RNA表达上调,海马Bax、Caspase-3 m RNA的表达上调、Bcl-2 m RNA表达下调。（4）肾不藏志不寐大鼠模型睡眠方面的变化:戊巴比妥实验发现肾不藏志不寐大鼠睡眠潜伏期延长、睡眠时间缩短,肾不藏志不寐大鼠脑电图WAKE增加、SWS1、SWS2、REMS和TST减少,血浆IL-1β、IL-6、TNF-α含量增加,脑5-HT、GABA含量减少、Glu含量增加,海马IL-6、TNF-αm RNA表达上调,海马5-HT1AR、GABAARα1m RNA表达下调、m Glu R2 m RNA表达上调。（5）肾不藏志不寐大鼠海马转录组分析结果:与空白对照组相比,肾不藏志不寐组的差异基因共有1628个,其中上调基因上调887个,下调741个;差异基因的功能涉及神经发育、细胞发育、甘油三酯代谢、核糖体、氧化应激、炎性因子;并与帕金森病、阿尔茨海默病、逆行神经的信号通路、慢性进行性舞蹈病有密切联系。通过组间差异基因GO分析、KEGG Pathway分析、蛋白互作分析以及肾不藏志不寐内涵,筛选肾不藏志不寐组的关键差异基因并进行验证,发现肾不藏志不寐大鼠海马显着差异基因为Gnb3、Faah、Mmp9、Twist1。（6）远志可以提高肾不藏志不寐大鼠学习记忆能力,增加模型大鼠海马5-HT、GABA的含量、降低Glu的含量,降低血浆IL-1β、IL-6、TNF-α的含量。（7）药物干预肾不藏志不寐大鼠的海马转录组分析结果:（1）与肾不藏志不寐组相比,远志组的差异基因共有663个,其中上调240个,下调423个;差异基因主要涉及神经发育、昼夜节律调控、细胞凋亡与增殖、氧化磷酸化、能量代谢、免疫调节;并与帕金森病、阿尔茨海默病、慢性进行性舞蹈病、非酒精性脂肪肝、I型糖尿病、哮喘的发生有密切联系。（2）与肾不藏志不寐组相比,地西泮组的差异基因共有1660个,其中上调基因732个,下调基因928个;差异基因主要涉及神经系统发育的调控、氧化磷酸化、神经元凋亡、氧化应激、能量代谢;并与帕金森病、慢性进行性舞蹈病、阿尔茨海默病、非酒精性脂肪肝有密切联系。（3）远志对肾不藏志不寐干预作用的差异基因235个,其中显着治疗作用的基因37个;差异基因的功能涉及神经元发育、γ-氨基丁酸信号通路、细胞生长调控、参与免疫球蛋白介导的免疫应答、能量代谢;并与慢性进行性舞蹈病、帕金森病、阿尔茨海默病、I型糖尿病、非酒精性脂肪肝等有关。（4）地西泮对肾不藏志不寐干预作用的差异基因753个,其中显着治疗作用的基因49个;差异基因涉及中枢神经系统发育、老化、突触的调节、凋亡的调控、多巴胺、糖原、脂肪酸、嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸代谢。并与慢性进行性舞蹈病、帕金森病、阿尔茨海默病、非酒精性脂肪肝、心肌收缩、单纯疱疹病毒感染等有关。（5）肾不藏志不寐与远志、地西泮关联的靶标基因及分子通路分析:通过组间差异基因GO分析、KEGG Pathway分析以及肾不藏志不寐内涵,筛选肾不藏志不寐组、远志组和地西泮组的关键差异基因并进行验证,发现远志有效靶基因为Faim、Pcp2、Elovl6;地西泮有效靶基因为Npr3、Trh;两药共同作用的靶点为BDNF、Gabra6。结结论:（1）肾志与不寐有着密切联系,肾不藏志是肾不藏志不寐的核心病机,补益肾脏、安神定志为肾不藏志不寐的治疗原则,远志是归经入肾的的安肾志药物,具有安神、强志、益肾的功效,是治疗志异常的首选药物。（2）D-半乳糖联合PCPA可以建立肾不藏志不寐大鼠模型。（3）肾不藏志不寐大鼠模型与衰老相关的学习记忆能力、氧化应激、凋亡记忆基因的表达发生了改变,与睡眠相关的睡眠时间、脑电图、神经递质和炎性因子的表达发生了改变。（4）肾不藏志不寐大鼠模型海马存在基因转录水平上的变化,显着差异基因功能涉及神经系统、代谢和炎症等。（5）远志可以改善肾不藏志不寐大鼠的睡眠、调节神经递质、降低炎性因子的表达。（6）远志和地西泮对肾不藏志不寐大鼠海马的神经系统和炎症相关基因具有一定的干预效应,远志更侧重对神经功能相关靶基因的调节。
吴静[6]（2020）在《CREB调控海马GABAA受体表达在耐药性癫痫中的作用研究》文中指出目的:癫痫是一种常见的神经系统疾病。c AMP反应元件结合蛋白（c AMP response element binding protein,CREB）和苔藓纤维出芽（mossy fiber sprouting,MFS）可能在癫痫发病、发作、耐药性和认知功能障碍中具有重要作用。然而其参与癫痫病理过程的具体机制尚不明确。本研究旨在大鼠原代海马神经元和大鼠癫痫模型中探讨CREB对γ-氨基丁酸（gamma-Aminobutyric acid,GABA）A受体表达和癫痫发作的调控作用以及MFS与癫痫发作、耐药性以及认知功能障碍之间的相关性。方法:第一部分:构建CREB过表达慢病毒、CREB sh RNA干扰慢病毒和相应对照慢病毒。由SD乳鼠分离获得大鼠原代海马神经元。在10天的培养和Neu N抗体免疫荧光鉴定后,将原代海马神经元分为对照组、过表达组、过表达对照组、干扰组和干扰对照组。使用CREB过表达慢病毒、CREB干扰慢病毒和其对照慢病毒分别转染并改变相应组中原代海马神经元CREB表达水平。7天后使用Western blot检测并比较各组原代海马神经元（n=3）中CREB、p-CREB及GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。同时使用荧光定量PCR检测并比较各组原代海马神经元（n=3）中CREB及GABAA受体α1、β2和γ2亚基m RNA水平。第二部分:除10只作为正常对照外,使用剩余190只SD大鼠构建氯化锂-匹罗卡品癫痫模型。随后使用苯妥英钠和苯巴比妥进行耐药性筛选。根据耐药性筛选结果,将SD大鼠分为对照组、药敏过表达组、药敏过表达对照组、药敏干扰组、药敏干扰对照组、耐药过表达组、耐药过表达对照组、耐药干扰组和耐药干扰对照组（n=10）。将CREB过表达慢病毒、CREB干扰慢病毒和其对照慢病毒分别注射至相应组中大鼠双侧海马区域。视频监测各组大鼠转染前后癫痫发作频率和持续时间。使用脑深部电极记录右侧海马脑电图。使用Western blot检测各组大鼠（n=3）海马组织中CREB、p-CREB及GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。使用免疫组化检测各组大鼠（n=3）海马齿状回颗粒层CREB和GABAA受体α1亚基蛋白水平。使用Timm染色检测各组大鼠（n=4）海马齿状回MFS情况。统计分析各组间癫痫发作频率、发作持续时间、脑电频率、脑电波幅、蛋白表达水平和Timm评分是否存在差异。第三部分:除12只作为对照组外,38只SD大鼠被用于构建氯化锂-匹罗卡品癫痫模型。经苯妥英钠和苯巴比妥耐药性筛选分为药敏组（n=18）和耐药组（n=8）。视频监测各组大鼠癫痫发作频率。使用新物体识别试验和Morris水迷宫试验检测其认知功能障碍。使用Timm染色检测大鼠齿状回MFS水平。比较各组间癫痫发作频率、物体记忆、空间记忆和MFS水平的差异。使用Spearman秩相关性检验分析各因素间相关性。结果:第一部分:过表达组中原代海马神经元较过表达对照组CREB蛋白和m RNA水平以及p-CREB蛋白水平均明显增高,GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白和m RNA水平均明显降低。干扰组原代海马神经元较干扰对照组原代海马神经元CREB蛋白和m RNA水平以及p-CREB蛋白水平均明显下降,而GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白和m RNA水平均明显增高。第二部分:在药敏性和耐药性癫痫模型大鼠中,注射CREB过表达慢病毒后癫痫发作频率和持续时间均较注射前明显增高;注射CREB干扰慢病毒后癫痫发作频率和持续时间均较注射前明显降低;注射CREB过表达对照病毒和CREB干扰对照病毒前后癫痫发作频率和持续时间改变无统计学意义。药敏过表达组和耐药过表达组大鼠均较相应对照组大鼠具有更高的脑电频率和波幅、较高的海马CREB和p-CREB蛋白水平和较低的GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。药敏干扰组和耐药干扰组大鼠均较相应对照组大鼠具有较低的脑电频率和波幅,较低的海马CREB和p-CREB蛋白水平和较高的GABAA受体α1、β2和γ2亚基蛋白水平。第三部分:氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠较正常大鼠物体记忆和空间记忆学习能力均明显下降。耐药性癫痫大鼠较药敏性癫痫大鼠癫痫发作更为频繁,MFS更为明显,空间记忆学习能力障碍也更为严重。氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠的癫痫发作频率和空间记忆学习能力之间可能存在相关性。结论:改变大鼠海马神经元中CREB蛋白表达可能可以相应的改变p-CREB蛋白水平并负向调控GABAA受体α1、β2和γ2亚基表达和转录水平。过表达CREB蛋白可能增高氯化锂-匹罗卡品癫痫模型大鼠发作频率和强度,而干扰CREB蛋白表达可能降低其发作频率和强度。MFS可能与癫痫模型大鼠耐药性有关。癫痫发作频率、耐药性和空间记忆功能损害三者在癫痫模型大鼠中可能存在相关性。
刘梅[7]（2020）在《党参多糖对环已酰亚胺所致记忆巩固障碍小鼠脑保护作用及其机制研究》文中提出社会进入老龄化,生理或病理性的衰老问题日益严峻。针对自然衰老和老年性痴呆、血管性痴呆等神经退行性疾病密切相关的学习记忆的研究和防治有着重要的医学和社会学意义。学习记忆过程,需经历短时记忆、长时记忆的转化,将大脑获得的外界信息进行强化、整合,存储于特定脑区后变得稳固,并且受到脑内神经递质和神经激素的调节,转化过程中的蛋白合成对记忆巩固至关重要。c AMP应答元件结合蛋白（c AMP-response element binding protein,CREB）是一种重要的核转录因子,是许多细胞内信号转导通路的交汇点,影响到神经元的再生、突触的产生和学习记忆的发展。另外,细胞内Ca2+水平的升高可使CREB发生磷酸化,形成新的突触联系,形成长时程记忆。Ca2+与Ca2+结合蛋白（calmodulin,Ca M）结合,进而活化Ca M依赖性蛋白激酶（calcium-calmodulin dependent protein kinase,CaMK）,CaMKⅡ、CaMKⅣ是CREB的重要蛋白激酶。深入探讨通过调控细胞内Ca2+水平,进而影响Ca2+/CaMK/CREB通路,有助于研究如何改善学习记忆的作用机制。植物多糖因其高效低毒备受关注,成为当今新药、食疗保健品开发的方向之一。研究表明,枸杞多糖、黄芪多糖、党参多糖等许多植物多糖都可通过增强免疫、抗炎、抗氧化等不同机制发挥脑保护作用。党参多糖（Codonopsis pilosula polys accharide,CPPS）是党参含量最多,且最重要的活性成分之一,不仅能抗衰老、提高免疫力,还可以抗凝血、抑制氧自由基。并有研究表明,CPPS可改善东莨菪碱、亚硝酸钠等造成的多种小鼠的学习记忆障碍,对D-半乳糖所致衰老模型小鼠有抗衰老作用。但CPPS是否可以改善环己酰亚胺所致记忆巩固障碍,以及详尽的脑保护作用机制未见报道。本研究利用蛋白酶抑制剂环己酰亚胺造成小鼠空间记忆巩固障碍,探讨CPPS对学习记忆的保护作用及其可能的作用机制。实验分为正常对照组、环己酰亚胺模型组、脑复康阳性对照组、CPPS 300mg·kg-1组、CPPS 150mg·kg-1组。各组小鼠灌胃给药,连续15天。然后进行Morris水迷宫的空间记忆和空间探索实验,连续5天,观察各组小鼠的学习记忆巩固能力的变化情况。期间,通过腹腔注射环己酰亚胺 (120mg·kg-1)抑制记忆蛋白合成,造成记忆巩固障碍。行为学实验结束后,断头取脑,剥离海马组织,提取蛋白,利用ELISA酶联免疫法测定小鼠海马组织中特异性蛋白PKA、CaMK、CREB的含量变化;并利用蛋白免疫印迹法检测小鼠海马组织中CaMKⅡ/CREB信号通路的相关蛋白的表达情况,从分子水平阐明CPPS改善记忆巩固障碍的作用机制。Morris水迷宫实验结果显示,腹腔注射环己酰亚胺可造成小鼠记忆巩固障碍（P<0.01）,脑复康500mg·kg-1、党参多糖300mg·kg-1和150mg·kg-1可不同程度改善小鼠的空间记忆障碍和空间探索能力减退（P<0.05,P<0.01）。ELISA实验结果显示,与正常对照组相比,环己酰亚胺模型组小鼠海马组织中的PKA、CaMK和CREB含量均有显着性差异（P<0.05,P<0.01）;与环己酰亚胺模型组比较,脑复康阳性药物对照组、党参多糖各剂量组小鼠海马组织中CaMK、CREB含量明显增加（P<0.05,P<0.01）。蛋白免疫印迹实验结果显示,与正常对照组相比,环己酰亚胺模型组小鼠海马组织中的CaMKⅡ和CREB的蛋白表达均有显着性差异（P<0.05,P<0.01）;与环己酰亚胺模型组比较,脑复康阳性药物对照组、党参多糖各剂量组小鼠海马组织中CaMKⅡ和CREB的蛋白表达均明显增加（P<0.05,P<0.01）。上述结果表明,环己酰亚胺可造成小鼠记忆巩固障碍,且与其影响CaMK/CREB信号通路有关,党参多糖可改善由环己酰亚胺所致小鼠的记忆巩固障碍,机制与上调CaMKⅡ/CREB信号通路的蛋白表达有关。
胡慧玲[8]（2020）在《不同浓度七氟烷对老年大鼠认知功能及海马cAMP-CREB-BDNF通路的影响》文中指出目的:建立吸入不同浓度七氟烷所致的老年大鼠认知功能障碍模型,通过检测海马组织中环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（c AMP response element binding protein,CREB）、脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factor,BDNF）、蛋白激酶A（Protein Kinase A,PKA）和环磷酸腺苷（Cyclic Adenosine monophosphate,c AMP）的表达变化,探讨七氟烷对认知功能影响的相关机制。方法:健康的18-20月龄老年SD大鼠105只,随机分为对照组（C组,n=21）和实验组（S组,n=84,每个亚组S1,S2,S3,S4各21只）,S1-S4亚组分别吸入1%、2%、3%、4%七氟烷6h,对照组仅吸入50%空氧混合气体（2L/min）6h。五组老龄大鼠在麻醉处理前后都要进行Morris水迷宫实验,通过对跟踪所得的数据（逃避潜伏期、游泳总距离、原平台穿越次数和原平台象限停留时间）分析并判断造模是否成功。造模成功后第1d、3d和7d通过Western Blot和Real-time PCR分别检测大鼠海马区CREB、BDNF、c AMP、PKA的表达变化及CREBm RNA、BDNFm RNA的相对表达水平。结果:1.Morris水迷宫实验结果显示:⑴与C组比较,麻醉后第1d,S2、S3和S4组在逃避潜伏期、游泳总距离、原平台穿越次数和原平台象限停留时间均有统计学意义（P<0.05）;⑵五组大鼠各自组内对比结果显示:麻醉后第1d与麻醉前相比,S2、S3和S4组以上四组指标均有统计学意义（P<0.05）;2.Western Blot和Real-time PCR结果显示:与C组同一时间对比,⑴S2、S3和S4组老龄大鼠在吸入相应七氟烷浓度6h后第1d海马组织中CREB、BDNF、PKA、c AMP表达和CREBm RNA、BDNFm RNA均下调明显,差异有统计学意义（P<0.05）;⑵麻醉后第3d和7d表达逐渐上调,第3d各组相比差异有统计学意义（P<0.05）,第7d各组相比差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1.持续吸入2%以上浓度七氟烷6h可导致老年SD大鼠认知功能障碍,并且随吸入浓度升高,对认知功能的影响更深。2.c AMP-CREB-BDNF信号通路可能参与七氟烷致老年SD大鼠认知功能障碍的发生,该损伤与吸入七氟烷后下调CREB、BDNF的表达有关。
王红梅[9]（2020）在《针刺对抑郁大鼠海马NOD样受体蛋白3炎性小体信号通路的影响》文中研究表明[背景]抑郁症（depression）以显着而持久的心境低落为主要特征,是一种严重危害人类身心健康的常见精神疾患,具有高患病率、高复发率及高自杀死亡率的特点,给社会带来沉重的负担。目前,药物治疗是抗抑郁治疗的主流疗法,尽管临床存在近几十种抗抑郁药物,但仍存在抑郁症患者治疗效果不佳或治疗无效,且多数抑郁药物临床应用患者表现出明显的不良反应。众多研究表明,针刺可以明显改善轻中度抑郁患者的症状,尤其在改善患者情绪、改善睡眠、缓解躯体疼痛等方面,且安全性好、不良反应小。针灸抗抑郁治疗效果显着,但是抗抑郁症的作用机制仍不明确,有待深入研究。近年来NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体在抑郁症发病机制中的作用,受到了越来越多的关注。在目前已发现炎性小体中,NLRP3炎性小体是研究较为明确的一种。NLRP3炎性小体由NLRP3受体蛋白、凋亡相关的斑点样蛋白（ASC）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1前体（pro-Caspase-1）三部分复合而成。NLRP3作为胞内模式识别受体,当识别到进入细胞内环境的病原相关分子模式（PAMPs）、细胞或组织损伤产生的损伤相关分子模式（DAMPs）时,ASC作为接头蛋白募集pro-Caspase-1,产生具有酶活性的Caspase-1,形成NLRP3炎性小体。Caspase-1进而引起炎性细胞因子白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-18（IL-18）活化,引发炎症反应,参与抑郁症发病机制。我们前期研究表明,慢性应激可以上调大鼠海马促炎性细胞因子,针刺可以通过逆转促炎性因子表达,来缓解抑郁症的炎症反应。本研究在前期研究的基础上,采用慢性不可预知温和应激（CUMS）制备抑郁模型,探讨针刺对海马NLRP3炎性小体信号通路关键分子的影响,阐释针刺治疗抑郁症的可能机制。[目的]本实验研究采用慢性不可预知温和应激抑郁大鼠模型,观察针刺对慢性应激抑郁大鼠行为学的影响,以及对大鼠海马内NLRP3炎性小体信号通路上关键分子NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18的影响,探讨针刺治疗抑郁症的可能机制,为针刺治疗抑郁症的临床提供科学依据。[方法]1.动物分组:雄性SPF级SD大鼠32只,体重（200±20）g,随机分成正常组、模型组、针刺组和氟西汀组,每组8只。2.模型制备方法:采用慢性不可预知温和应激方法建立抑郁大鼠模型。大鼠连续每天随机给予以下7种刺激的一种:禁食24h、禁水24h、通宵照明12h、频闪2h、束缚2h、夹尾2min、冷水游泳（水温4℃）5min。每一种应激方法7d内只使用1次。造模持续6周。3.治疗方法:针刺方法:选用百会穴和印堂穴,每天于慢性应激造模前1h进行针刺,留针1Omin。留针时大鼠保持自由体态。6周造模期间每天1次,每连续针刺6d休息1d。给药方法:氟西汀组在每日造模应激前1h氟西汀灌胃给药（10mg/kg）,持续6周。4.行为学观察:（1）糖水实验:在造模前和造模结束时检测,用糖水偏好百分率反映大鼠快感缺失行为。（2）旷场实验:造模结束后,将大鼠放入自制的旷场箱内,记录5分钟各组大鼠水平穿越格数和站立次数,反映大鼠的探索活动。5.指标检测:（1）采用蛋白印迹法（Western blot）检测大鼠海马中NLRP3、ASC、Caspase-1的蛋白表达。（2）采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠海马IL-1β和IL-18的含量。6.统计方法:实验结果以均数±标准差（x±s）表示,采用单因素方差分析,并进一使用LSD法进行组间差异分析。以P<0.05作为差异有显着性的标准。[结果]1.针刺对大鼠行为学的影响:（1）糖水偏好实验:造模开始前,各组大鼠基线无显着性差异（P>0.05）。造模结束后,与正常组相比,模型组大鼠糖水偏好百分率显着降低（P<0.01）。与模型组相比,针刺组和氟西汀组大鼠糖水偏好百分率均显着升高（P<0.05,P<0.05）。与氟西汀组相比,针刺组大鼠糖水偏好百分率无显着性差异（P>0.05）。（2）旷场实验:造模结束后,与正常组相比,模型组大鼠穿越格数和站立次数均显着降低（P<0.05,P<0.05）。与模型组相比,针刺组大鼠穿越格数和站立次数均显着升高（P<0.05,P<0.05）。与模型组相比,氟西汀组大鼠穿越格数显着升高（P<0.05）,站立次数有升高趋势、但差异无统计学意义（P>0.05）。与氟西汀组相比,针刺组大鼠穿越格数和站立次数均无显着性差异（P>0.05,P>0.05）。2.针刺对大鼠海马NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达的影响:（1）海马NLRP3的表达:与正常组相比,模型组大鼠海马NLRP3的表达显着升高（P<0.01）。与模型组相比,针刺组和氟西汀组大鼠海马NLRP3的表达均显着降低（P<0.01,P<0.01）。与氟西汀组相比,针刺组大鼠海马NLRP3的表达无显着性差异（P>0.05）。（2）海马ASC的表达:与正常组相比,模型组大鼠海马ASC的表达显着升高（P<0.01）。与模型组相比,针刺组和氟西汀组大鼠海马ASC的表达均显着降低（P<0.01,P<0.01）。与氟西汀组相比,针刺组大鼠海马ASC的表达无显着性差异（P>0.05）。（3）海马Caspase-1的表达:与正常组相比,模型组大鼠海马Caspase-1的表达显着升高（P<0.01）。与模型组相比,针刺组和氟西汀组大鼠海马Caspase-1的表达均显着降低（P<0.01,P<0.01）。与氟西汀组相比,针刺组大鼠海马Caspase-1的表达无显着性差异（P>0.05）。3.针刺对大鼠海马IL-1β、IL-18含量的影响:（1）海马IL-1β的含量:与正常组相比,模型组大鼠海马IL-1β含量显着升高（P<0.01）。与模型组相比,针刺组和氟西汀组大鼠海马IL-1β蛋白的含量均显着降低（P<0.01,P<0.01）。与氟西汀组相比,针刺组大鼠海马IL-1β含量无显着性差异（P>0.05）。（2）海马IL-18的含量:与正常组相比,模型组大鼠海马IL-18含量明显升高（P<0.05）。与模型组相比,针刺组和氟西汀组大鼠海马IL-18蛋白的含量均明显降低（P<0.05,P<0.05）。与氟西汀组相比,针刺组大鼠海马IL-18含量无显着性差异（P>0.05）。[结论]1.慢性应激抑郁大鼠糖水偏好百分率、旷场实验活动性明显下降,出现抑郁样行为;针刺和氟西汀均可提高糖水偏好百分率和旷场实验活动性,显示了抗抑郁效应。2.慢性应激抑郁大鼠海马NLRP3/Caspase-1炎性小体信号通路关键分子NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白表达显着升高,并可以被针刺和氟西汀治疗逆转,提示针刺和氟西汀可以抑制海马NLRP3炎性小体信号通路的激活,缓解炎症反应。3.本研究提示,针刺治疗抑郁症,可能是通过抑制海马NLRP3炎性小体活化,下调NLRP3/Caspase-1炎性小体信号通路上关键分子的表达,缓解海马炎症反应,从而改善抑郁症状。这将为临床针刺治疗抑郁症提供重要的科学依据。
刘雁泽[10]（2019）在《电针单穴与腧穴配伍对睡眠剥夺模型大鼠学习记忆能力调节效应的对照研究》文中研究说明目的:1、通过水迷宫实验,检测电针前后睡眠剥夺模型大鼠空间学习和记忆能力改变情况。2、对比电针单穴与配伍腧穴在治疗睡眠剥夺后大鼠学习、记忆能力下降方面的效应差异。3、研究电针干预对睡眠剥夺模型大鼠海马体中睡眠相关神经递质调节机制,研究电针单穴与配伍腧穴治疗失眠的疗效,为失眠神经生物学机制和临床针刺治疗失眠提供理论依据。方法:健康雄性SD大鼠共60只,随机分成6组,每组10只,分别是正常组、模型组、百会组、神门组、三阴交组与百会-神门-三阴交配伍组（简称“三才组”）。（1）实验开始前适应性喂养一周,腹腔注射对氯苯丙氨酸（PCPA）建立睡眠剥夺模型（2）造模成功后的第2天,使用Morris水迷宫对各组大鼠的认知功能进行连续4天的评估,进行定位巡航实验及空间探索实验。（3）同时进行电针干预,治疗结束后1h取材,采用蛋白质印迹法（Western Blot）检测大鼠海马体中与学习记忆相关的蛋白激酶A-Cβ亚基（PKA-Cβ）、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（P-CREB）、脑源性神经营养因子（BDNF）及原肌球蛋白受体激酶（TrkB）表达情况。结果:（1）水迷宫定位航行实验显示,神门穴组、百会组、三阴交组和配伍组潜伏期显着缩短（p<0.05）,配伍组潜伏期低于其他三治疗组（p<0.05）。空间探索实验结果显示,模型组大鼠穿越平台原位置的次数明显减少（p<0.05）,百会组、三阴交组和配穴组穿越次数明显增多（p<0.05）,而配伍组的次数明显多于其他三治疗组,提示针刺单穴神门、百会和配伍均显着改善了失眠大鼠空间工作记忆能力,其中配伍组改善效果最佳。（2）与正常组大鼠相比,模型组大鼠海马组织内BDNF、TrkB、P-CREB和PKA-Cβ蛋白表达量明显降低（p<0.01,p<0.05,p<0.05,p<0.01）,针刺神门穴后海马组织内BDNF、TrkB和PKA-Cβ表达量显着升高（p值均<0.05）,针刺百会穴后TrkB和PKA-Cβ表达量明显上调（p<0.05,p<0.05）,针刺三阴交穴后BDNF和TrkB的表达量明显上调（p<0.05,p<0.05）,针刺配伍腧穴后BDNF、TrkB、P-CREB和PKA-Cβ表达量明显上调（p<0.01,p<0.05,,p<0.05,p<0.01）,且BDNF的表达明显高于百会组（p<0.05）,PKA-Cβ蛋白表达量明显高于三阴交组（p<0.05）,说明腧穴配伍对失眠大鼠海马内改善学习记忆相关蛋白的表达的上调作用优于单穴。结论:1.Morris水迷宫可以作为评价睡眠剥夺模型大鼠学习记忆能力的有效性指标。2.无论从行为学方面还是学习记忆相关蛋白表达,电针都可以有效调节大鼠睡眠剥夺所导致的学习记忆功能障碍。3.电针可激活海马神经元内学习记忆功能相关的PKA-Cβ→P-CREB→BDNF/TrkB信号调节通路,不同程度的影响其蛋白质的表达,而且腧穴配伍的影响效应优于单穴,推测其将导致多种神经生理活动的变化并促进海马神经细胞的分化、再生及存活,从而改善失眠大鼠的学习记忆功能。
二、中枢学习记忆功能与环磷酸腺苷反应单元结合蛋白的关系（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、中枢学习记忆功能与环磷酸腺苷反应单元结合蛋白的关系（论文提纲范文）
（1）环磷酸腺苷反应元件结合蛋白-脑源性神经营养因子信号通路功能低下与抑郁症（论文提纲范文）
| 一、CREB-BDNF/TrkB信号通路概述 |
| 1、CREB: |
| 2、BDNF: |
| 3、TrkB: |
| 二、CREB-BDNF/TrkB信号通路功能低下与抑郁症 |
| 1.CREB与抑郁症： |
| 2.BDNF与抑郁症： |
| 3.TrkB与抑郁症： |
| 4.CREB-BDNF/TrkB信号通路功能低下与抑郁症： |
| 总结与展望 |
（2）基于PI3K/AKT信号通路探讨鹿茸多肽改善轻度认知功能障碍的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 第一章 VAP鉴定及检测 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 基于网路药理学探讨鹿茸改善MCI的作用机制 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三章 基于PI3K/AKT信号通路探讨VAP改善不同MCI模型大鼠认知功能障碍的作用机制 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 第四章 基于代谢组学分析VAP改善MCI模型大鼠认知功能障碍的作用机制 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 数据处理 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 第五章 基于PI3K/AKT信号通路探讨VAP拮抗由OA诱导的受损HT22细胞的作用机制 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简介 |
（3）基于“肝应春，主疏泄、调节情志”研究松果腺在四季调节海马功能的机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 综述 |
| 综述一 “肝应春”理论现代实验研究进展 |
| 1 “肝主疏泄,应时而变”现代实验研究进展 |
| 2 “肝藏血,应时而变”现代实验研究进展 |
| 3 “肝主疏泄、藏血,应时而变”生理机制研究进展 |
| 4 评述与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 松果腺-MT与情志的相关性研究进展 |
| 1 中医学对情志与疾病的认识 |
| 2 松果腺-MT参与情志调控机制的研究进展 |
| 3 评述与展望 |
| 参考文献 |
| 综述三 Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路与情志的相关性研究进展 |
| 1 Gs、Gi与情志的相关性研究进展 |
| 2 AC-cAMP-PKA与情志的相关性研究进展 |
| 3 CREB与情志的相关性研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 理论研究 |
| 1 “肝主疏泄,调节情志”理论内涵 |
| 1.1 “肝主疏泄,调节情志”研究现状及不足 |
| 1.2 从“五藏应时”分析“肝主疏泄,调节情志”的理论内涵 |
| 1.3 “肝主疏泄、调节情志,应时而变”的调控机制 |
| 2 “肝主疏泄、调节情志,应时而变”与松果腺四季调控海马的相关性 |
| 2.1 海马调节情志功能与中医“肝主疏泄,调节情志”密切相关 |
| 2.2 松果腺-MT对海马的直接调控作用 |
| 2.3 松果腺-MT-海马与情志的季节性变化相关 |
| 3 松果腺-MT四季调控海马情志功能的细胞信号转导机制 |
| 3.1 “松果腺-MT-海马神经内分泌网络”的细胞信号转导机制与G蛋白信号通路相关 |
| 3.2 松果腺-MT四季调控海马情志功能与Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路相关 |
| 参考文献 |
| 第三部分 实验研究 |
| 实验一 松果腺-MT对海马MTR四季表达的影响 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要实验设备及试剂 |
| 2.3 实验步骤和方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 四季节律及松果腺对MT浓度的影响 |
| 3.2 四季节律及松果腺对海马MTR表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 四季节律对血清MT季节节律性的影响 |
| 4.2 松果腺对血清MT表达的影响 |
| 4.3 四季节律对海马MTR季节节律性的影响 |
| 4.4 松果腺-MT对海马MTR表达的影响 |
| 4.5 手术创伤及麻醉对松果腺-MT-海马MTR表达的影响 |
| 参考文献 |
| 实验二 松果腺-MT对海马Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路四季表达的影响 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要实验设备及试剂 |
| 2.3 实验步骤和方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 四季节律及松果腺对海马Gs、Gi蛋白表达的影响 |
| 3.2 四季节律及松果腺对海马AC表达的影响 |
| 3.3 四季节律及松果腺对海马cAMP表达的影响 |
| 3.4 四季节律及松果腺对海马PKA表达的影响 |
| 3.5 四季节律及松果腺对海马CREB表达的影响 |
| 3.6 四季节律及松果腺对海马CREB mRNA表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 四季节律对海马Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路季节节律性的影响 |
| 4.2 松果腺-MT对海马Gs、Gi蛋白表达的影响 |
| 4.3 松果腺-MT对海马AC表达的影响 |
| 4.4 松果腺-MT对海马cAMP-PKA-CREB表达的影响 |
| 4.5 手术创伤及麻醉对海马Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路的影响 |
| 4.6 松果腺-MT四季调控海马MTR-Gs/Gi-cAMP-PKA-CREB信号通路的特点 |
| 4.7 松果腺-MT多途径调控海马功能 |
| 4.8 “肝主疏泄、调节情志,应时而变”与松果腺季节性调控Gs/Gi信号通路相关 |
| 参考文献 |
| 第四部分 结语 |
| 1 结论 |
| 1.1 理论研究方面 |
| 1.2 实验研究结论 |
| 2 特色与创新点 |
| 2.1 理论创新 |
| 2.2 思路创新 |
| 2.3 方法创新 |
| 3 不足与展望 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）牛磺酸促进生长受限胎鼠近远期脑发育及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 牛磺酸激活PKA-CREB-BDNF信号通路促进生长受限胎鼠神经干细胞分化研究 |
| 1 实验材料及方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第二部分 牛磺酸对生长受限胎鼠海马远期代谢影响 |
| 1 实验材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第三部分 牛磺酸对生长受限胎鼠远期感觉运动及海马突触素表达影响 |
| 1 实验材料和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 综述 生长受限胎儿脑损伤与牛磺酸的研究进展 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（5）肾不藏志不寐的理论及实验研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 肾不藏志不寐理论研究 |
| 1 肾、志的含义及两者之间的关系 |
| 2 肾藏志对寐寤的调节作用 |
| 3 肾不藏志不寐的因机证治 |
| 4 常用安肾志的方药 |
| 5 小结 |
| 第二部分 肾不藏志不寐大鼠模型研究 |
| 研究一 肾不藏志不寐大鼠氧化应激、凋亡基因、炎性因子和神经递质的实验研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 研究二 肾不藏志不寐大鼠海马转录组学研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 安肾志药物远志对肾不藏志不寐大鼠镇静促眠作用的实验研究 |
| 研究一 远志对肾不藏志不寐大鼠神经递质和炎性因子的影响 |
| 1 研究内容与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 研究二 远志对肾不藏志不寐大鼠作用的海马转录组学研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 失眠大鼠模型的建立及中药治疗对氯苯丙氨酸致失眠模型大鼠的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
（6）CREB调控海马GABAA受体表达在耐药性癫痫中的作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 CREB在正常大鼠原代海马神经元中调控GABA_A受体亚基蛋白表达 |
| 引言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 CREB在氯化锂-匹罗卡品大鼠癫痫模型中调控GABA_A受体亚基蛋白表达及癫痫发作 |
| 引言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 氯化锂-匹罗卡品大鼠耐药性癫痫模型认知功能障碍和苔藓纤维出芽 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 CREB蛋白与癫痫研究进展 |
| 参考文献 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
| 学位论文数据集 |
（7）党参多糖对环已酰亚胺所致记忆巩固障碍小鼠脑保护作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 党参和党参多糖药理作用及其作用机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）不同浓度七氟烷对老年大鼠认知功能及海马cAMP-CREB-BDNF通路的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 术后认知功能障碍与阿尔茨海 病相关机制的思考 |
| 参考文献 |
| 缩略语表 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（9）针刺对抑郁大鼠海马NOD样受体蛋白3炎性小体信号通路的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 抑郁症现代研究进展 |
| 1 抑郁症概述 |
| 2 抑郁症发病机制研究 |
| 3 抑郁症的病变脑区研究 |
| 4 针灸对抑郁症的认识 |
| 5 小结 |
| 综述二 NLRP3炎性小体与抑郁症的研究进展 |
| 1 NLRP3炎性小体的组成 |
| 2 NLRP3炎性小体的活化 |
| 3 NLRP3炎性小体及相关细胞因子与抑郁症 |
| 4 针刺治疗抑郁症机制研究 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验动物与分组 |
| 1.2 主要仪器与设备 |
| 1.3 主要药品与试剂 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 针刺对大鼠行为学的影响 |
| 2.2 针刺对大鼠海马NLRP3蛋白表达的影响 |
| 2.3 针刺对大鼠海马ASC蛋白表达的影响 |
| 2.4 针刺对大鼠海马Caspase-1蛋白表达的影响 |
| 2.5 针刺对大鼠海马IL-1β含量的影响 |
| 2.6 针刺对大鼠海马IL-18含量的影响 |
| 第三部分 讨论 |
| 1 慢性应激抑郁模型选择依据 |
| 2 针刺治疗抑郁症选穴依据 |
| 3 阳性对照药物选择依据 |
| 4 针刺对慢性应激抑郁大鼠行为学的影响 |
| 5 针刺对慢性应激抑郁大鼠NLRP3炎性小体通路关键分子的影响 |
| 6 针刺对慢性应激大鼠海马IL-1β、IL-18的影响 |
| 7 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）电针单穴与腧穴配伍对睡眠剥夺模型大鼠学习记忆能力调节效应的对照研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 观测指标与检测结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
四、中枢学习记忆功能与环磷酸腺苷反应单元结合蛋白的关系（论文参考文献）
- [1]环磷酸腺苷反应元件结合蛋白-脑源性神经营养因子信号通路功能低下与抑郁症[J]. 王睿,吴睦霖,王伟,邢宇双,徐天娇,王琪,张宁. 齐齐哈尔医学院学报, 2021(21)
- [2]基于PI3K/AKT信号通路探讨鹿茸多肽改善轻度认知功能障碍的作用机制研究[D]. 刘玥欣. 长春中医药大学, 2021(01)
- [3]基于“肝应春，主疏泄、调节情志”研究松果腺在四季调节海马功能的机制[D]. 韩琦. 北京中医药大学, 2021(02)
- [4]牛磺酸促进生长受限胎鼠近远期脑发育及机制研究[D]. 方琼. 南方医科大学, 2021(02)
- [5]肾不藏志不寐的理论及实验研究[D]. 任小娟. 新疆医科大学, 2020(02)
- [6]CREB调控海马GABAA受体表达在耐药性癫痫中的作用研究[D]. 吴静. 贵州医科大学, 2020(04)
- [7]党参多糖对环已酰亚胺所致记忆巩固障碍小鼠脑保护作用及其机制研究[D]. 刘梅. 河北北方学院, 2020(06)
- [8]不同浓度七氟烷对老年大鼠认知功能及海马cAMP-CREB-BDNF通路的影响[D]. 胡慧玲. 内蒙古医科大学, 2020(03)
- [9]针刺对抑郁大鼠海马NOD样受体蛋白3炎性小体信号通路的影响[D]. 王红梅. 北京中医药大学, 2020(04)
- [10]电针单穴与腧穴配伍对睡眠剥夺模型大鼠学习记忆能力调节效应的对照研究[D]. 刘雁泽. 长春中医药大学, 2019(02)