一、犬旋股下动脉侧支血管内皮细胞的体外培养（论文文献综述）
林苗远,杨继滨,闫文强,胡宁,刘子铭,张莉,李豫皖[1]（2021）在《组织工程技术促进股骨头坏死骨组织再血管化的研究进展》文中进行了进一步梳理目的总结采用组织工程技术促进股骨头坏死（osteonecrosis of the femoral head,ONFH）骨组织再血管化的研究进展。方法广泛查阅近年国内外相关文献,阐明股骨头血管化机制,对组织工程技术在促进ONFH骨组织再血管化中的应用进展进行总结归纳。结果重建或改善股骨头血供是治疗ONFH的关键,目前组织工程研究热点主要基于种子细胞、支架材料以及促血管生成因子三方面,联合3D打印技术和药物递送系统来促进股骨头骨组织再血管化。结论基于组织工程技术的股骨头再血管化策略,有望改善局部血供,延缓甚至逆转ONFH进展。
刘沛[2]（2020）在《淫羊藿苷经lncRNA GAS5/miRNA-222轴调控激素性股骨头坏死BMECs成血管分化的机制研究》文中进行了进一步梳理研究背景股骨头坏死（osteonecrosis of femoral head,ONFH）是骨科的常见病、难治病,因长期、大剂量应用糖皮质激素所致的激素性股骨头坏死（steriod-induced osteonecrosis of femoral head,SONFH）约占ONFH总数的35%～50%。课题组前期研究发现,骨微血管内皮细胞（bone microvascular endothelial cells,BMECs）数量减少和功能异常与 SONFH 的发生发展密切相关。淫羊藿苷（icariin,ICA）是从中药淫羊藿中提取的一种黄酮类化合物单体。体内、体外研究表明:SONFH中的BMECs凋亡增加、迁移减慢、血管生成能力降低,ICA的干预能够逆转这一趋势。课题组前期研究还发现,ICA可以通过调控BMECs的miRNA表达而缓解SONFH的进展。然而,miRNA的差异表达还不能清晰阐释SONFH的发生机制,长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）能够通过“miRNA海绵”机制,负向调节miRNA的表达,进而调控其靶标mRNA的表达。据此,我们提出如下假说:ICA对SONFH的影响可能通过lncRNA/miRNA信号轴调控BMECs的分化表达。为验证这一假说是否成立,本课题设计了 4个实验,旨在进一步探讨ICA对SONFH的作用机制。目的1.分离、培养和鉴定BMECs,为后继实验提供细胞来源。2.在转录组层面分析SONFH的BMECs差异表达的mRNA、miRNA、lncRNA和circRNA。3.根据第二部分的测序结果,结合课题前期的研究,探究ICA能否通过miRNA-222调控糖皮质激素诱导的BMECs成血管分化。4.在第三部分的基础上,探究ICA是否通过lncRNA GAS5/miRNA-222信号轴调控糖皮质激素诱导的BMECs成血管分化。方法1.从5例SONFH患者和5例对照组患者髋关节置换术时切除的股骨头内取松质骨,采用酶消化法和密度梯度离心法分离、培养BMECs并传至第3代;免疫荧光法鉴定其表面抗原。2.通过高通量全基因组测序技术对两组样本的BMECs进行全转录组测序,得到SONFH差异表达的mRNA、miRNA、lncRNA和circRNA。通过生物信息学手段对差异表达显着的基因进行GO、Pathway、Disease富集分析,并对lncRNA-miRNA-mRNA和ceRNA进行共表达分析,阐述相关作用机制。3.利用细胞转染技术,分别用甲强龙（methylprednisolone,MPS）、MPS+ICA对BMECs进行不同的干预。qRT-PCR检测BMECs中miRNA-222的表达水平;Western blot检测成血管分化标志物碱性成纤维生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）、转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和前列腺素E（prostaglandin E,PGE）的蛋白水平;试剂盒检测BMECs 中 VEGF 活性。4.通过 RNA 结合蛋白免疫沉淀（RNA binding protein immunoprecipitation,RIP）和RNA下拉（RNA pull-down）实验验证lncRNA GAS5是否与miRNA-222的结合。通过RNA过表达和干扰技术观察lncRNA GAS5对miRNA-222表达的调控。分别用MPS、MPS+ICA 处理不同转染的 BMECs,qRT-PCR 检测lncRNA GAS5、miRNA-222 及 VEGF的表达水平,Western blot检测bFGF、TGF-β、VEGF和PGE的蛋白水平,试剂盒检测BMECs 中 VEGF活性。结果1.倒置显微镜下:两组标本所培养的成熟细胞呈“鹅卵石”或“铺路石”样。免疫荧光鉴定显示:两组细胞均表达血管性血友病因子（von Willbrand Factor,vWF）、血小板-内皮细胞粘附分子（platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31）,且阳性率达100%。上述结果表明所提取的细胞均具有血管内皮细胞的特征,且纯度较高。2.在 SONFH 组 BMECs 中发现 7856 个 mRNA、386 个 miRNA、1556 个 lncRNA和541个circRNA差异表达,对差异表达lncRNA-miRNA-mRNA和ceRNA构建共表达网络。差异mRNA主要富集在脉管系统形成、血管生成、血管形态、细胞迁移、细胞增殖、细胞周期等生物过程;差异miRNA主要富集在调控代谢进程、生物学质量、有机体细胞进程、细胞进程及信号通路、细胞分化、细胞形态等生物过程;差异circRNA主要富集在调控含核酸酶的复合物代谢、RNA代谢、RNA聚合酶Ⅱ转录、基因表达等生物过程;差异lncRNA-mRNA关系主要富集在调控组蛋白和DNA有序地形成核小体和染色质的生物过程。上述结果体现了 mRNA是具体功能的执行者,而miRNA、lncRNA和circRNA是功能调控者。3.与 MPS 组相比,MPS+ICA 组 miRNA-222 表达下调,bFGF、TGF-β、VEGF和PGE的mRNA水平及VEGF蛋白活性均明显上调。与MPS+ICA+mimic-NC组相比,MPS+ICA+miRNA-222 mimic 组 miRNA-222 表达上调,bFGF、TGF-β、VEGF和PGE的mRNA水平以及VEGF蛋白活性均显着下调。与MPS+ICA+inhibitor-NC组相比,MPS+ICA+miRNA-222 inhibitor 组 miRNA-222 表达下调,bFGF、TGF-β、VEGF和PGE的mRNA水平以及VEGF蛋白活性均明显上调。上述结果提示ICA可通过抑制miRNA-222表达而促进糖皮质激素诱导的BMECs成血管分化。4.RIP和RNA下拉实验结果表明lncRNA GAS5和miRNA-222之间存在相互作用。过表达lncRNA GAS5抑制BMECs中miRNA-222的表达,而干扰lncRNA GAS5上调miRNA-222的表达。在ICA作用下干扰lncRNA GAS5表达后,BMECs中miRNA-222的表达显着上调,bFGF、TGF-β、VEGF和PGE的mRNA水平显着下调以及VEGF蛋白活性显着降低,然而这些效应在转染miRNA-222 inhibitor后被逆转,提示ICA通过lncRNA GAS5/miRNA-222信号轴调节VEGF的表达以及BMECs的成血管分化。结论ICA通过上调lncRNA GAS5抑制miRNA-222的表达,被抑制的miRNA-222促进了 VEGF的表达,从而促进糖皮质激素诱导的BMECs的成血管分化,进而利于骨坏死的修复,延缓SONFH的进展。
洪一波[3]（2019）在《基于活血化瘀理论对鸡血藤有效组分防治股骨头坏死骨破坏的机制研究》文中研究指明目的:基于活血化瘀理论,从体外细胞培养的角度研究中药鸡血藤三种有效组分芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮对破骨细胞和成骨细胞分化及功能表达的调控作用,探讨其防治股骨头坏死骨破坏的机制。方法:实验一:体外分离C57/BL6小鼠股骨和胫骨内骨髓单核-巨噬细胞（BMMs）,用a-MEM培养基进行培养和增殖,首先进行细胞活性（CCK8）的检测,分别筛选出体外安全的范围;加入M-CSF和RANKL进行诱导分化,对照组加入DMSO,药物干预组分别加入不同浓度的芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮的工作液进行细胞培养,分别在细胞培养的4-6天后,进行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色,并对破骨细胞的数量进行计数和统计分析。实验二:对10μM浓度芒柄花素干预的破骨细胞中收取蛋白采用Western blot等技术检测破骨细胞分化中关键转录因子NFATcl和c-Fos的表达,检测破骨细胞分化中磷酸化蛋白ERK表达;提取RNA采用Real-Time PCR检测破骨细胞骨吸收相关基因CTSK、TRAP、MMP9和Car 2的表达。实验三:取体外分离培养的骨髓间充质干细胞（BMSCs）,加入成骨细胞诱导液和不同浓度的芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮,分别在细胞培养的5-7天后,进行碱性磷酸酶（ALP）染色观察成骨分化情况,在21天用茜素红染色观察成骨细胞的矿化能力;提取RNA采用Real-Time PCR检测10μM浓度芒柄花素干预的成骨细胞相关基因OCN、Col-1、ALP、Osterix和Runx2的表达。结果:实验一:CCK8细胞活性检测发现芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮能够抑制破骨细胞的生成,对BMMs有效的安全剂量是<20 μM（芒柄花素20μM浓度组p=0.278,p>0.05,大豆苷元20μM浓度组p=0.167,p>0.05,毛蕊异黄酮20μM浓度组p=0.462,p>0.05）;TRAP染色结果表明芒柄花素、大豆苷元、毛蕊异黄酮能够剂量依赖性的抑制破骨细胞的生成（芒柄花素5-20μM浓度组p=0.000,p<0.05,大豆苷元1-20μM浓度组p=0.000,p<0.05,毛蕊异黄酮2-20μM浓度组p=0.000,p<0.05）。实验二:Western blot检测表明芒柄花素（10μM）能够显着抑制破骨细胞分化中NFATcl和c-Fos的表达,而对磷酸化蛋白ERK的表达不明显;在破骨细胞功能上,Real-Time PCR检测芒柄花素（10 μM）能着抑制破骨细胞功能相关基因CTSK（P=0.000,P<0.05）、TRAP（P=0.000,P<0.05）、MMP9（P=0.000,P<0.05）和Car 2（P=0.000,P<0.05）的表达。实验三:在BMSCs培养7天后经ALP染色证明三种有效组分在一定浓度干预下能促进成骨细胞增殖、分化（芒柄花素5-25μM浓度组p=0.000,p<0.05,大豆苷元5-25μM 浓度组p=0.000,p<0.05,毛蕊异黄酮10-25μM 浓度组p=0.000,p<0.05）;培养21天茜素红染色矿化结节较对照组明显增多（芒柄花素5-20μM浓度组p=0.000,p<0.05,大豆苷元10-20μM浓度组p=0.000,p<0.05,毛蕊异黄酮5-20μM浓度组p=0.000,p<0.05）;在基因水平能显着提高成骨细胞相关基因OCN（P=0.000,P<0.05）、Col-1（P=0.000,P<0.05）、ALP（P=0.000,P<0.05）、Osterix（P=0.000,P<0.05）和Runx2（P=0.000,P<0.05）的表达。结论:中药鸡血藤有效组分能通过系统调控骨再生和骨吸收功能,发挥防治股骨头坏死骨破坏的作用,其机制可能与促进成骨细胞生成与活性以及抑制破骨细胞生成与活性相关。
吴曦[4]（2018）在《当归补血汤对早期股骨头坏死大鼠股骨头微结构、OPG/RANKL/RANK、VEGF164/VEGFR2影响的实验研究》文中研究表明目的:基于前期的临床观察,发现以辨“气血”思路进行辨证,以“补益气血、补血养髓”为治则,以当归补血汤为主方治疗早期股骨头坏死可获得一定疗效,本研究通过当归补血汤灌胃干预液氮冷冻法早期股骨头坏死大鼠模型,观察干预后影像学、组织形态、信号分子表达变化,探讨“气血不足、骨髓同病”的病机、辨“气血”辨证思想以及“补益气血、补血养髓”的治则在防治早期股骨头坏死中可能的机制。方法:将100只6月龄SPF级SD大鼠按照随机分段数字表法分为4组:对照组（Ctrl组）、造模组（M组）、250 mg/ml当归补血汤灌胃组（DB250组）、500 mg/ml当归补血汤灌胃组（DB500组）,SPF级实验室屏障内饲养,各组大鼠25只。适应性饲养1周后,行液氮法股骨头坏死大鼠造模,M组、DB250组、DB500组每只大鼠给予20%水合氯醛500mg/kg麻醉,后备皮、消毒,定位右侧髂棘中下1/3交点与大转子连线中点沿躯干纵轴切开,分层切开至关节囊,切开关节囊,使股骨头脱位并暴露,切断股骨头韧带,将自制冷冻杆置冷冻股骨头15次,每次3S,后常规缝合、抗生素注射、创口消毒、分笼饲养。术后60日时,配制成250 mg/ml、500 mg/ml浓度当归补血汤开始灌胃,4ml/次/日。各组大鼠在灌胃后第2周各组随机选取大鼠12只,完成X线、HE染色及计算空骨陷窝率、TRAP染色及计数破骨细胞数、Westernblot、免疫组化、Real time PCR等检测;灌胃4周后各组剩余大鼠完成X线摄影、MRI成像、MicroCT成像及数据采集、HE染色及计算空骨陷窝率、TRAP染色及计数破骨细胞数、Westernblot、免疫组化、Real time PCR等检测。结果:1.X线、MRI检查:DB250组、DB500组灌胃后2周及4周时股骨头外形、股骨头内水肿、头外水肿、股骨头基底部类骨样增生、髋关节关节间隙变窄、关节面不光滑程度均较M组有一定改善。2.Micro CT检测及数据分析:DB 250组4周时与M组在BMD（P<0.05）、Tb.Sp（P<0.05）等指标上有统计学差异;DB500组4周时与M组在TMD（P<0.05）、Tb.Sp（P<0.01）、SMI（P<0.05）等指标上有统计学差异。3.HE染色及空骨陷窝率:M组大鼠股骨头HE染色显示股骨头骨小梁稀疏,骨小梁走行不规则,骨小梁间隙增大,骨骺不清晰,部分可见区域性骨组织缺如,周围可见少量纤维组织增生,骨小梁间骨髓组织脂肪细胞增生,血管组织减少;DB250组、DB500组大鼠股骨头HE染色显示较M组有所改善。在灌胃4周后DB250组较M组空骨陷窝率有统计学差异（P<0.01）;DB500组较M组空骨陷窝率较统计学差异（P<0.05）。4.TRAP染色及多核TRAP染色阳性细胞计数:在灌胃后4周,多核TRAP染色阳性细胞数量DB250组及DB500组较M组减少,有统计学差异（P<0.05）。5.Westernbolt:灌胃后2周,DB250组（P<0.01）与DB500组（P<0.01）OPG表达与M组有统计学差异;灌胃后4周,DB250组（P<0.01）与DB500组（P<0.01）OPG表达与M组有统计学差异;灌胃后2周及4周,DB250组与DB500组RANKL表达与M组无统计学差异;灌胃后4周,DB250组（P<0.01）与DB500组（P<0.01）RANK表达与M组有统计学差异;灌胃后2周及4周,DB250组（P<0.01）与DB500组（P<0.01）RANKL/OPG表达与M组有统计学差异。6.免疫组化:灌胃后2周,DB250组（P<0.05）VEGF164表达MOD值与M组有统计学差异,灌胃后4周,DB250组（P<0.05）与DB500组（P<0.05）VEGF164表达MOD值与M组有统计学差异;灌胃后2周及4周,DB250组与DB500组VEGFR2表达MOD值与M组无统计学差异。7.Real time PCR:灌胃后2周,DB500组（P<0.05）OPG mRNA表达与M组有统计学差异,灌胃后4周,DB250组（P<0.01）与DB500组（P<0.01）OPG mRNA表达与M组有统计学差异;灌胃后2周,DB250组（P<0.01）与DB500组（P<0.01）RANKL mRNA表达与M组有统计学差异,灌胃后4周,DB250组（P<0.05）与DB500组（P<0.01）RANKL mRNA表达与M组有统计学差异;灌胃后2周及4周,DB250组与DB500组RANK mRNA表达与M组无统计学差异;灌胃后2周,DB250组（P<0.01）和DB500组（P<0.01）VEGF164mRNA表达与M组有统计学差异,灌胃后4周,DB250（P<0.05）组VEGF164 mRNA表达与M组有统计学差异;灌胃后2周及4周,DB250组与DB500组VEGFR2 mRNA表达与M组无统计学差异。结论:在辨“气血”辨证思路以及“补益气血、补血养髓”治则指导下,本研究使用当归补血汤干预液氮法早期大鼠股骨头坏死模型,发现其可改善股骨头骨髓水肿,改善HE染色股骨头病理学形态,降低空骨陷窝率,减少破骨细胞数目,提升骨密度,上调OPG、VEGF164表达,下调RANKL表达,降低RANKL/OPG比率。其作用机制可能是通过调控OPG/RANKL/RANK、VEGF164/VEGFR2信号,进而改善骨髓水肿、降低骨细胞死亡率、抑制破骨细胞过度活动,从而发挥防治作用。实验结果结合理论分析,当归补血汤干预对早期股骨头坏死大鼠股骨头有保护作用,在一定程度上证实辨“气血”辨证思路、“补益气血、补血养髓”治则在早期股骨头坏死中医药防治中的可行性。
陈波[5]（2017）在《脂肪干细胞辅助脂肪移植治疗局限性硬皮病的相关研究》文中研究指明目的:分析脂肪移植治疗局限性硬皮病的相关影响因素,探讨脂肪干细胞（ADSCs）辅助脂肪移植治疗局限性硬皮病的可行性。方法:（1）21例脂肪标本:局限性硬皮病患者脂肪标本6例（未使用药物治疗）,局限性硬皮病患者脂肪标本5例（曾使用药物治疗）,正常脂肪患者脂肪标本10例,提取脂肪标本中的干细胞,分离培养,比较脂肪干细胞数量、形态、增殖能力及成脂能力。（2）激光散斑对比成像方法测定8例局限性硬皮病患者病变部位及正常对侧部位的血流情况。（3）取局限性硬皮病病变部位皮肤标本2例及非硬皮病患者皮肤标本2例,行成纤维细胞培养后与脂肪颗粒混匀后移植入裸鼠,观察脂肪的存活情况。（4）博来霉素硬皮病造模裸鼠18例,正常裸鼠18例,各分为三组:对照组,脂肪移植组,脂肪干细胞+脂肪移植组。术后1月取移植脂肪称重,取注射部位裸鼠皮肤免疫组化测定TGF-β 1及Ⅲ型胶原含量。结果:（1）21例患者脂肪干细胞形态学无差异,成脂能力无差异,流式细胞仪检测第3代患者脂肪干细胞的表面标志CD44+都是90%以上,无明显差异。但局限性硬皮病患者（行激素治疗）的干细胞数量较正常人及局限性硬皮病患者（未行激素治疗）明显减少,细胞生长曲线延迟。（2）局限性硬皮病患者病变部位血流灌注为92.69±22.04,正常对侧部位为95.70 ±20.43,局限性硬皮病病变部位与对侧正常部位血流灌注无明显差异。（3）局限性硬皮病患者成纤维细胞+脂肪移植后脂肪重量约68.24±19.20mg,正常人成纤维细胞+脂肪移植后脂肪重量约88.42±20.15mg。（4）正常裸鼠脂肪移植组脂肪重量102.97±17.87mg,脂肪干细胞+脂肪移植组脂肪重量135.05 ±27.28 mg,硬皮病裸鼠移植脂肪重量77.54±12.40mg,脂肪干细胞+脂肪移植组脂肪重量102.48 ±23.16 mg。脂肪干细胞+脂肪移植的存活率均较单纯的脂肪移植存活率高。（5）对于正常裸鼠,TGF-β 1含量对照组为939.34±216.92,脂肪移植组为974.98±470.18,脂肪干细胞+脂肪移植组为967.66±448.74,Ⅲ型胶原含量对照组为623.85±113.84,脂肪移植组为605.73 ±217.17,脂肪干细胞+脂肪移植为599.34±89.39。对于硬皮病裸鼠,TGF-β1含量对照组为1945.95 ±330.77,脂肪移植组为1418.86 ±376.82,脂肪干细胞+脂肪移植为1132.12±190.69,Ⅲ型胶原含量对照组为2629.39±746.62,脂肪移植组为1531.74±836.41,脂肪干细胞+脂肪移植为946.92±448.90。正常裸鼠经脂肪移植或脂肪干细胞+脂肪移植后TGF-β 1含量及Ⅲ型胶原含量无明显改变。但对于硬皮病裸鼠,脂肪移植或者脂肪干细胞+脂肪移植可降低硬皮病组裸鼠的TGF-β 1含量及Ⅲ型胶原含量,尤其是脂肪干细胞移植后效果更加明显。结论:（1）局限性硬皮病患者的脂肪移植不同于正常人群的脂肪移植,长期应用激素治疗病史及病变部位的微环境是影响硬皮病患者脂肪移植存活的关键因素,而局限性硬皮病患者的病变部位血供较正常侧无明显改变。（2）脂肪干细胞辅助脂肪移植不仅可提高脂肪存活率,同时还可减轻硬皮病裸鼠的皮肤胶原沉积。
伍丽君[6]（2016）在《固定长宽比狭长窄蒂携带最大成活面积皮瓣及压力差技术治疗淤血皮瓣的动物实验及临床应用研究》文中研究指明目的：①通过制作蒂部长宽比为4cm:2cm携带不同面积瓣部的狭长窄蒂皮瓣动物模型,观察皮瓣愈合及成活过程中组织内CD34、PI3k、Akt、NOS的表达情况及变化规律和皮瓣组织内微血管的变化情况,以进一步探讨狭长窄蒂皮瓣成活机制；②制作狭长窄蒂皮瓣淤血动物模型,应用压力差技术改善狭长窄蒂皮瓣血供,探讨促进狭长窄蒂皮瓣成活的方法；③并应用于临床。方法：①基础实验部分1：制作固定长宽比例狭长窄蒂携带不同面积的任意皮瓣动物模型。50只新西兰大白兔被随机分成5组,每组10只,5组皮瓣蒂长宽比均为4cm：2cm,每个长宽比例的狭长窄蒂携带5个不同面积的任意皮瓣,直径分别为4cm、5cm、6cm、7cm、8cm、并依次命名为A、B、C、D、E,其中A瓣为B、C、D、E瓣的对照瓣,在每组每只兔子的双侧背部形成A、B、C、D、E皮瓣,蒂部距背部中线2cm,顺序随机排列。对每组皮瓣进行大体观察、皮瓣温度测定、术后14天观察皮瓣成活情况,用标准网格纸测量成活长度,计算成活面积。并于术中、术后1、3、5、7、14天,分别切取各组皮瓣远端中部全层组织,大小为0.2cm×0.2cm,作为标本,通过HE染色、组织芯片、免疫组化和酶联免疫（ELISA）等技术方法,对皮瓣组织内CD34、PI3k、Akt、NOS进行定性、定量分析。②基础实验部分2：制作狭长窄蒂皮瓣淤血动物模型,皮瓣蒂长宽比为4cm：2cm,狭长窄蒂携带瓣部直径为8cm的任意皮瓣。20只新西兰大白兔,在每只兔子的双侧背部形成狭长窄蒂皮瓣,蒂部距背部中线2cm,顺序随机排列。一侧术后安装负压引流装置（实验组）,一侧术后常规打包（对照组）。对每组皮瓣进行大体观察,术后14天观察皮瓣成活情况,计算成活面积。并于术后3、5、7天,分别切取各组皮瓣远端中部全层组织,大小为0.2cm×0.2cm,作为标本,通过HE染色,观察不同时间皮瓣组织学变化。③临床应用部分：收集各种原因所致的皮肤软组织缺损可通过狭长窄蒂皮瓣修复的病例50例。结果： ①当狭长窄蒂的长宽比例为4cm：2cm时,随着皮瓣面积的增加,皮瓣成活面积也随之增大,但瓣部直径达8cm时皮瓣远端即发生坏死；②组织学分析发现,CD34、PI3k、Akt、NOS在狭长窄蒂皮瓣成活过程中,因术中组织损伤及对组织缺血缺氧反应,术后在组织中含量均增加,并分别在术后5、3、3、3天达到高峰；随着血管新生出现,组织血供改善,创伤愈合,CD34、PI3k、Akt、NOS在组织中含量逐渐减少,14天后渐接近正常,成一定规律；③压力差可促进狭长窄蒂皮瓣成活,实验侧较对照侧皮瓣肿胀、水肿程度明显减轻,淤血情况较对照侧明显改善。④狭长窄蒂皮瓣是修复较大面积软组织缺损的较理想方法。结论：①一定长宽比例的狭长窄蒂所能携带的任意皮瓣成活面积有其最大值,一定范围内增大皮瓣面积会导致皮瓣坏死；②CD34、PI3k、Akt、NOS在狭长窄蒂皮瓣的成活过程中有重要作用；③压力差技术可促进狭长窄蒂皮瓣成活；④狭长窄蒂皮瓣是修复较大面积软组织缺损的较理想方法。
康凯,邵林,韩剑锋,俞亮,孙浩淞,杜大江[7]（2016）在《应用骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死的研究进展》文中研究说明股骨头坏死（osteonecrosis of the femoral head,ONFH）是一种呈进行性发展的难治性疾病,为患者带来极大的痛苦。该病是由多种病因造成的股骨头内骨松质及骨细胞血液供应缺乏而坏死,进而导致股骨头关节软骨下骨变性、坏死、塌陷,最终形成骨性关节炎[1]。ONFH主要发病年龄在30-40岁,其男性患者发病率为女性的3倍;另外,75%的患者为
王宁[8]（2014）在《糖尿病对内皮祖细胞不同细胞亚群数量及EPCs表达TLR4的影响以及SDF-1对EPCs移植疗效的影响研究》文中进行了进一步梳理目的：构建经济、高效的脐带血来源的内皮祖细胞分离、培养平台,为今后的糖尿病患者的异体移植提供基础；对比糖尿病不同并发症患者之间以及糖尿病患者与对照人群之间的不同EPCs亚群的数量,并分析EPC亚群细胞数量与糖尿病并发症的相关性；对比糖尿病大鼠与正常大鼠EPCs表达TLR4、eNOS的差异,及LPS刺激对EPCs的TLR4/NF-KB的影响；比较SDF-1α共培养对EPCs的影响,以及SDF-1α预处理的EPCs移植对糖尿病大鼠下肢缺血的疗效。方法：通过改良的密度梯度离心法和羟乙基淀粉结合密度梯度离心法分离人脐带血中的单个核细胞,按1.0×106/cm2接种于鼠尾胶包被的培养皿中,用EGM-2培养基进行诱导培养7天,进行细胞鉴定、检测。采用流式细胞仪检测糖尿病患者及非糖尿病对照人群的外周血CD34+、CD133+、KDR+及CD133+KDR+细胞数量,对比分析不同糖尿病并发症之间以及糖尿病与对照组之间,各细胞亚群数量的变化。动物实验部分,采用大鼠骨髓单个核细胞定向培养为内皮祖细胞（EPCs）:1)对比观察来源于糖尿病大鼠和正常大鼠的Epcs勺增殖能力、黏附能力,细胞表面TLR4的表达、分泌IL-6、TNF-α及eNOS的量；观察EPCs、巨噬细胞及两种细胞的混合细胞培养时,分别加入不同浓度LPS,观察细胞TLR4、NF-κBvIL-6、TNF-α的表达量；2)使用lOng/ml SDF-1α与EPCs共培养48小时,观察EPCs勺增殖能力、黏附能力的变化。以糖尿病大鼠为对象,采用股动脉结扎法制造糖尿病下肢缺血大鼠模型,使用SDF-1α预处理的EPCs多点肌肉注射,动脉造影法观察下肢血管变化,评估细胞移植的治疗效果。结果：采用改良的细胞分离及培养方法,可以成功获得内皮祖细胞,并且可以使人脐带血来源的内皮祖细胞培养的细胞活率达99.3%±0.33%；脐带血源收获细胞数量高于外周血；细胞的增殖峰也明显高于外周血来源的内皮祖细胞。糖尿病患者外周血EPC数量明显低于对照组,LDL-c,BMI,腰围和尿微量白蛋白浓度与糖尿病组EPC数量呈负相关。不同的糖尿病并发症的EPC亚群细胞数量有所不同。糖尿病大鼠与正常对照大鼠骨髓单个核细胞来源的内皮祖细胞培养结果比较显示：糖尿病大鼠EPCs数量较正常对照组明显减少（29.21±1.56vs49.08±5.83）/（视野×200）（P<0.05）。糖尿病组大鼠EPCs的增殖能力（0.51±0.05vs0.69±0.02）和黏附能力（28.03±3.51vs46.24±2.51）/（视野×200）均较正常对照组低（P<0.05）。糖尿病组EPCs的eNOS活性显着低于正常对照组（1.47±0.46vs3.23±0.74U/ml）（P<0.05）。糖尿病组EPCs的TLR4表达显着高于正常对照组（3.8%vs1.6%）（P<0.05）。而糖尿病组EPC培养基中IL-6、TNF-α浓度均高于对照组,其中两组间IL-6表达量有统计学差异：IL-6（pg/ml）,1039±28vs675±32, P<0.05; TNF-α（pg/ml）,216±31vs198±29。不同浓度LPS刺激EPCs、巨噬细胞及两种混合培养细胞,结果显示,内皮祖细胞比巨噬细胞有更高的TLR4表达率,低浓度LPS （10ng/ml）对EPCs已产生有效刺激；TLR4高表达的同时,相应培养基中有IL-6、TNF-α浓度的增加,以IL-6浓度增加更明显。SDF-1α对EPCs功能影响的观察显示,lOng/ml SDF-1α即能显着增加EPCs的增殖能力和黏附能力。对比观察生理盐水、无预处理的EPCs和SDF-1α预处理的EPCs移植治疗糖尿病大鼠下肢缺血性疾病,动脉造影结果显示,生理盐水组血管数为4.0±2.3；EPCs移植组血管数为9.1±2.8; SDF-1α共培养的内皮祖细胞移植组血管数为12.9±2.3；三组间血管数比较,EPCs组和SDF-1α共培养的内皮祖细胞组多于生理盐水组,并有统计学意义（P<0.05）; SDF-1α共培养的内皮祖细胞组多于EPCs组,差异有统计学意义（P<0.05）。三组肌肉总抗氧化能力、eNOS、一氧化氮检测结果显示,SDF-1α共培养的内皮祖细胞组的总抗氧化能力、一氧化氮高于EPCs组和生理盐水组。结论：1)采用改良的分离、培养方法可以由人脐带血获得充足来源的内皮祖细胞,其增殖及扩增能力更高,有更好的移植利用潜能；2)糖尿病伴有EPC数量的减少,但不同的糖尿病并发症时,EPC各亚群的细胞数量是不同的。LDL-c, BMI,腰围和尿微量白蛋白与EPC数量呈负相关性；3)糖尿病伴随着EPCs的数量减少以及增殖、黏附功能受损。糖尿病状态可以导致EPC高表达TLR4,使细胞处于低度炎症状态,同时减少eNOS分泌。LPS低浓度对EPCs即为有效刺激,巨噬细胞的TLR4表达低于EPCs,两种细胞的混合细胞共同培养时,LPS刺激可以产生出更多的TLR4表达,提示两种细胞可能存在促炎的协同作用；4)SDF-1α可以显着增强EPCs的粘附能力和增殖能力,SDF-1α对正常大鼠EPCs的粘附能力和增殖能力有增强作用,对糖尿病大鼠的EPCs也有相似作用；5) SDF-1α与EPC共培养后移植,提高糖尿病大鼠下肢缺血的疗效,糖尿病状态下,SDF-1α对EPCs的动员和归巢有促进作用。大鼠下肢血供改善主要来自于新生血管形成和／或原有细小血管的代偿性增粗。
张丽,韩毅,徐世莲,罗耀辉,刘彤,马华[9]（2010）在《干细胞移植治疗兔下肢肢体缺血的实验研究》文中研究说明目的探讨体外培养的自体骨髓间充质干细胞治疗兔下肢肢体缺血的治疗效果.方法将体外培养扩增后获得的自体骨髓干细胞悬液分别注射于家兔右下肢缺血模型的股动脉周围的大腿肌肉群内.术后3、6周后通过血管造影术及病理学方法,检测患肢侧支循环和血管新生情况.结果体外培养的自体骨髓间充质干细胞治疗兔下肢肢体缺血取得了满意的疗效.结论体外培养的自体骨髓间充质干细胞不能治疗下肢缺血性疾病的一种有效方法.
李鹏[10]（2010）在《中药联合血管内皮祖细胞移植治疗下肢动脉硬化性闭塞症的动物实验研究》文中研究指明目的建立下肢动脉硬化性闭塞症的动物实验模型,采用中药联合骨髓来源的血管内皮祖细胞移植的方法,观察有无促进血管新生的作用,为中药联合干细胞移植治疗下肢动脉硬化性闭塞症的临床应用提供新的理论基础和实验依据。方法选取36只Wistar雄性大鼠,钳夹双侧股动脉，结扎、离断分支血管,并予高脂饲料喂养,建立下肢动脉硬化性闭塞症的大鼠实验模型。在术后第12周分别选取6只,检测血清总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）；处死取下肢股-腘动脉,制作病理切片。用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化大鼠的骨髓间充质干细胞,体外培养传代扩增,培养过程中加入诱导因子使其体外定向转化为血管内皮祖细胞。应用流式细胞仪对内皮祖细胞表面标记物CD34、CD133和FLK-1进行检测。以5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）标记的血管内皮祖细胞通过肌肉注射的方式移植于24只模型大鼠的右侧后肢,同体左侧后肢相同部位注射生理盐水作为对照。从中选取12只予中药连续治疗14天,称为B组,余称为A组。治疗后第28天检测TC、TG、HDL和LDL,分别于治疗后第14天和第28天处死动物,取双下肢肌肉组织,制作病理切片,行免疫组织化学（FⅧ、BrdU）检查,计数每个视野FⅧ阳性染色的毛细血管数目。统计学处理数据,分析变化。结果通过中药和血管内皮祖细胞移植治疗28天,A组和B组血清TC、TG、HDL和LDL均较治疗前（第12周组）明显好转（P<0.05）,B组治疗效果优于A组（P<0.05）。通过治疗14天和28天,A组和B组大鼠后肢肌肉组织内均有新生血管形成。各时段新生毛细血管密度B组与A组相比,平均每视野FⅧ染色阳性的毛细血管数目B组明显多于A组（P<0.05）。A组和B组大鼠右侧后肢肌肉间可见BrdU阳性染色的血管内皮细胞,左侧后肢肌肉间未见阳性染色。结论血管内皮祖细胞可以从骨髓间充质干细胞体外诱导获得,联合中药治疗肢体局部缺血的大鼠,二者共同参与血管再生或重建,增加缺血部位的毛细血管的密度,改善血供,调节血清脂质水平。
二、犬旋股下动脉侧支血管内皮细胞的体外培养（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、犬旋股下动脉侧支血管内皮细胞的体外培养（论文提纲范文）
（2）淫羊藿苷经lncRNA GAS5/miRNA-222轴调控激素性股骨头坏死BMECs成血管分化的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 非编码RNA在激素性股骨头坏死中的研究进展 |
| 1 MIRNA在SONFH的研究进展 |
| 1.1 miRNA概述 |
| 1.2 miRNA与疾病 |
| 1.3 miRNA在SONFH中的作用 |
| 2 LNCRNA在SONFH的研究进展 |
| 2.1 lncRNA概述 |
| 2.2 lncRNA与疾病 |
| 2.3 LncRNA在ONFH中的作用 |
| 3 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 干细胞移植治疗股骨头坏死的研究进展 |
| 1 基础研究 |
| 1.1 作用机制 |
| 1.2 干细胞的基因工程 |
| 1.3 间充质干细胞产生的外泌体 |
| 2 临床应用 |
| 2.1 干细胞移植治疗股骨头坏死的临床疗效 |
| 2.2 患者选择 |
| 2.3 干细胞来源选择 |
| 2.4 移植细胞的数量 |
| 2.5 干细胞移植方式 |
| 2.6 安全性 |
| 3 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验部分 |
| 前言 |
| 1. 激素性股骨头坏死的研究现状和研究意义 |
| 2. 淫羊藿苷通过促进BMECs延缓SONFH的发展 |
| 3. MINA调控BMECs成血管分化 |
| 4. 长链非编码RNA调控BMECs成血管分化 |
| 5. 小结 |
| 参考文献 |
| 实验一 骨微血管内皮细胞的分离、培养和鉴定 |
| 一、材料与方法 |
| 1. 标本来源 |
| 2. 主要试剂与仪器 |
| 3. 实验方法 |
| 二、实验结果 |
| 1. 细胞形态学观察 |
| 2. 表面抗原鉴定 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 激素性股骨头坏死骨微血管内皮细胞转录组差异的初步研究 |
| 一、材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 二、结果 |
| 1. SONFH的BMECs中miRNA的差异表达谱 |
| 2. SONFH的BMECs中mRNA和lncRNA的差异表达谱 |
| 3. SONFH的BMECs中circRNA的差异表达谱 |
| 4. 差异表达miRNA、lncRNA-mRNA和circRNA的功能分析 |
| 5. lncRNA-miRNA-mRNA共表达分析 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 淫羊藿苷通过MIRNA-222调控糖皮质激素诱导的BMECS的成血管分化 |
| 一、材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 淫羊藿苷经LNCRNA GAS5/MIRNA-222信号轴调控糖皮质激素诱导的BMECS成血管分化 |
| 一、材料与方法 |
| 1. 材料 |
| 2. 方法 |
| 二、结果 |
| 1. 验证lncRNA GAS5与miRNA-222的结合以及lncRNA GAS5对miRNA-222表达的调控 |
| 2. 验证ICA通过GAS5/miRNA-222信号轴调节BMECs血管生成 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 1 结论 |
| 2 创新性 |
| 3 不足之处与展望 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）基于活血化瘀理论对鸡血藤有效组分防治股骨头坏死骨破坏的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 绪论 |
| 第一章 文献研究 |
| 一、股骨头坏死的发病机制研究 |
| 1 流行病学调查 |
| 2 创伤性ONFH |
| 3 非创伤性ONFH |
| 二、股骨头坏死保守治疗的方法和进展 |
| 1 物理治疗 |
| 2 药物治疗 |
| 参考文献 |
| 第二章 活血化瘀理论在治疗股骨头坏死中的应用 |
| 一、中医学对股骨头坏死的认识 |
| 二、活血化瘀理论的研究与运用 |
| 1 活血化瘀理论在骨伤科的应用 |
| 2 运用活血化瘀理论治疗股骨头坏死的机制研究 |
| 三、基于活血化瘀理论防治股骨头坏死的临床应用 |
| 1 导师王建伟教授治疗股骨头坏死经验总结 |
| 2 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 实验研究 |
| 前言 |
| 本研究技术路线图 |
| 实验一 中药鸡血藤有效组分调控破骨细胞分化的形态学研究 |
| 1 研究背景 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 鸡血藤有效组分芒柄花素抑制破骨细胞分化的机制研究 |
| 1 研究目的 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验三 鸡血藤有效组分调控成骨细胞分化的实验研究 |
| 1 研究背景 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 一、全文总结 |
| 二、本研究的突破点与创新点 |
| 三、不足与展望 |
| 附录 |
| 附录一: 治疗股骨头坏死的临床常用活血化瘀类中药的初步统计和分析 |
| 附录二: 股骨头坏死的相关信号通路研究进展 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（4）当归补血汤对早期股骨头坏死大鼠股骨头微结构、OPG/RANKL/RANK、VEGF164/VEGFR2影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstrat |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 实验部分 |
| 实验一 液氮冷冻法早期股骨头坏死大鼠模型的建立及鉴定 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 动物造模验 |
| 2.2 X线、MRI、MicroCT |
| 2.3 HE染色及空骨陷窝率计算 |
| 3 结果 |
| 3.1 股骨头大体观 |
| 3.2 X线 |
| 3.3 MRI(T2像) |
| 3.4 MicroCT |
| 3.5 HE染色(见图3) |
| 3.6 液氮冷冻法大鼠股骨头坏死模型的鉴定 |
| 4 讨论 |
| 4.1 造模动物的选择 |
| 4.2 早期股骨头坏死大鼠模型验证技术选择 |
| 4.3 液氮冷冻法早期股骨头坏死大鼠模型的特点 |
| 实验二 当归补血汤的制备与高效液相色谱法检测 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验仪器及试剂 |
| 1.2 当归补血汤组方中药饮片 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 当归补血汤的制备 |
| 2.2 当归补血汤高效液相色谱检测阿魏酸、芒柄花素含量… |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 当归补血汤的历史沿革 |
| 4.2 当归补血汤的药理学作用 |
| 4.3 当归补血汤的有效成分及本实验检测指标选择 |
| 4.4 当归补血汤的配伍比例 |
| 实验三 当归补血汤对液氮冷冻法早期股骨头坏死大鼠股骨头X线、MRI、MicroCT、HE染色、TRAP染色影响的实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 X线、MRI、MicroCT影像、HE染色实验材料 |
| 1.2 TRAP染色实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验动物分组、造模、当归补血汤灌胃干预 |
| 2.2 实验动物X线、MRI、MicroCT检查 |
| 2.3 切片HE染色及TRAP染色 |
| 3 结果 |
| 3.1 大鼠一般情况 |
| 3.2 股骨头大体观 |
| 3.3 X线 |
| 3.4 MRI(T2像) |
| 3.5 MicroCT |
| 3.6 HE染色及空骨陷窝率 |
| 3.7 TRAP染色及多核TRAP阳性细胞计数 |
| 3.8 实验结果小结 |
| 4 讨论 |
| 4.1 当归补血汤干预动物模型的方式与浓度 |
| 4.2 当归补血汤对液氮法早期股骨头坏死大鼠模型的微形态学的影响 |
| 实验四 当归补血汤对早期股骨头坏死大鼠股骨头OPG、RANKL、RANK、VEGF164、VEGFR2表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 动物组织 |
| 1.2 实验设备、试剂 |
| 1.3 抗体 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 Westernblot |
| 2.2 免疫组织化学 |
| 2.3 Real-timePCR |
| 3 结果 |
| 3.1 Westernblot结果 |
| 3.2 免疫组化结果 |
| 3.3 RealtimePCR结果 |
| 3.4 各组大鼠股骨头蛋白质表达小结 |
| 3.5 各组大鼠股骨头mRNA表达小结 |
| 4.讨论 |
| 4.1 OPG/RANKL/RANK、VEGF/VEGFR2与股骨头坏死… |
| 4.2 当归补血汤对动物模型OPG/RANKL/RANK、VEGF/VEGFR2表达的影响 |
| 理论探讨部分 |
| 1.股骨头坏死发病机制概要 |
| 1.1 股骨头的解剖结构与血供特点 |
| 1.2 骨重建与修复 |
| 1.3 股骨头坏死的病因病理机制 |
| 1.4 股骨头坏死的分期与治疗 |
| 2.VEGF/VEGFR2与OPG/RANKL/RANK成血管、成骨偶联 |
| 2.1 VEGF/VEGFR2在成骨中的作用 |
| 2.2 VEGF/CEGFR2与OPG/RANKL/RANK的协同作用 |
| 3.祖国传统医学对股骨头坏死的认识 |
| 3.1 历代医家对股骨头坏死的认识 |
| 3.2 股骨头坏死的病因病机 |
| 3.3 股骨头坏死的辨证论治 |
| 4.当代医家对股骨头坏死的认识及研究 |
| 4.1 体质辨识 |
| 4.2 当代各家辨证思想 |
| 4.3 股骨头坏死的中药治疗与研究 |
| 5.当归补血汤干预液氮法大鼠股骨头坏死模型机制探讨及思考 |
| 5.1 当归补血汤干预液氮法大鼠股骨头坏死模型的作用机制 |
| 5.2 当归补血汤在股骨头坏死辨证论治中的思考 |
| 结语 |
| 创新性 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 1.综述 |
| 参考文献 |
| 2.发表论文及学术活动 |
| 致谢 |
（5）脂肪干细胞辅助脂肪移植治疗局限性硬皮病的相关研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 中英文对照 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 实验设计 |
| 第一部分: 脂肪移植治疗局限性硬皮病的影响因素分析 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分: 脂肪干细胞辅助脂肪移植治疗硬皮病裸鼠模型 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 结论 |
| 研究创新点 |
| 文献综述(一) 局限性硬皮发病机制及治疗 |
| 参考文献 |
| 文献综述(二) 脂肪移植最新研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（6）固定长宽比狭长窄蒂携带最大成活面积皮瓣及压力差技术治疗淤血皮瓣的动物实验及临床应用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 实验部分 |
| 实验材料 |
| 第一部分 固定长宽比狭长窄蒂携带最大 成活面积皮瓣动物实验研究 |
| 实验目的 |
| 实验分组及皮瓣设计 |
| 实验方法与步骤 |
| 实验结果 |
| 第一部分 实验结果总结 |
| 第二部分 压力差技术促进狭长窄蒂皮瓣成活实验研究 |
| 实验目的 |
| 实验分组及皮瓣设计 |
| 实验方法与步骤 |
| 实验结果 |
| 第二部分 实验结果总结 |
| 第三部分 狭长窄蒂任意皮瓣临床应用典型病例 |
| 1 病例资料 |
| 2 手术方法 |
| 3 结果 |
| 4 典型病例 |
| 第三部分 实验结果总结 |
| 讨论 |
| 实验结论 |
| 参考文献 |
| 综述 外科皮瓣移植的最新研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文及科研成果 |
| 中英文对照缩略词表 |
| 致谢 |
（7）应用骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死的研究进展（论文提纲范文）
| 1 ONFH的发病机制 |
| 2 BMMSCs |
| 3 MSCs用于治疗ONFH |
| 3. 1 髓芯减压和MSCs移植 |
| 3. 2 骨组织工程技术和MSCs |
| 3. 3 基因转染BMMSCs移植 |
| 3. 4 MSCs动脉灌注 |
| 4 总结 |
（8）糖尿病对内皮祖细胞不同细胞亚群数量及EPCs表达TLR4的影响以及SDF-1对EPCs移植疗效的影响研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 人脐带血与外周血来源的血管内皮祖细胞体外培养的比较研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 内容与方法 |
| 1.3 质量控制 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二部分 糖尿病患者内皮祖细胞数量的相关分析及表型特点分析 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 内容与方法 |
| 1.3 质量与控制 |
| 1.4 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 TLR4介导的炎症反应对糖尿病大鼠EPCs数量和功能的影响 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 内容与方法 |
| 1.3 质量控制 |
| 1.4 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四部分 SDF-1α预处理的EPCs移植治疗糖尿病大鼠下肢缺血病变的研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 内容与方法 |
| 1.3 质量控制 |
| 1.4 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 内皮祖细胞相关细胞特性的研究新进展及相关治疗进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简历 |
| 导师评阅表 |
（9）干细胞移植治疗兔下肢肢体缺血的实验研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 动物模型的制备 |
| 1.4 自体骨髓间充质干细胞的获取、体外培养、细胞悬液制备 |
| 1.5 干细胞移植术 |
| 1.6 观测指标 |
| 1.6.1 动脉造影 |
| 1.6.2 病理切片 |
| 1.6.3 毛细血管密度测定 |
| 1.8 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 DSA动脉造影 |
| 2.2 病理学检测 |
| 3 讨论 |
（10）中药联合血管内皮祖细胞移植治疗下肢动脉硬化性闭塞症的动物实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、下肢动脉硬化性闭塞症的动物模型的建立与鉴定 |
| 1 对象和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 二、血管内皮祖细胞的培养与鉴定 |
| 1 对象和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 三、中药联合血管内皮祖细胞移植的治疗效果 |
| 1 对象和方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 |
| 中药和血管内皮祖细胞对缺血性血管新生作用的研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
四、犬旋股下动脉侧支血管内皮细胞的体外培养（论文参考文献）
- [1]组织工程技术促进股骨头坏死骨组织再血管化的研究进展[J]. 林苗远,杨继滨,闫文强,胡宁,刘子铭,张莉,李豫皖. 中国修复重建外科杂志, 2021(11)
- [2]淫羊藿苷经lncRNA GAS5/miRNA-222轴调控激素性股骨头坏死BMECs成血管分化的机制研究[D]. 刘沛. 北京中医药大学, 2020(04)
- [3]基于活血化瘀理论对鸡血藤有效组分防治股骨头坏死骨破坏的机制研究[D]. 洪一波. 南京中医药大学, 2019(08)
- [4]当归补血汤对早期股骨头坏死大鼠股骨头微结构、OPG/RANKL/RANK、VEGF164/VEGFR2影响的实验研究[D]. 吴曦. 湖北中医药大学, 2018(12)
- [5]脂肪干细胞辅助脂肪移植治疗局限性硬皮病的相关研究[D]. 陈波. 北京协和医学院, 2017(11)
- [6]固定长宽比狭长窄蒂携带最大成活面积皮瓣及压力差技术治疗淤血皮瓣的动物实验及临床应用研究[D]. 伍丽君. 苏州大学, 2016(11)
- [7]应用骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死的研究进展[J]. 康凯,邵林,韩剑锋,俞亮,孙浩淞,杜大江. 山西医科大学学报, 2016(02)
- [8]糖尿病对内皮祖细胞不同细胞亚群数量及EPCs表达TLR4的影响以及SDF-1对EPCs移植疗效的影响研究[D]. 王宁. 新疆医科大学, 2014(02)
- [9]干细胞移植治疗兔下肢肢体缺血的实验研究[J]. 张丽,韩毅,徐世莲,罗耀辉,刘彤,马华. 昆明医学院学报, 2010(05)
- [10]中药联合血管内皮祖细胞移植治疗下肢动脉硬化性闭塞症的动物实验研究[D]. 李鹏. 天津医科大学, 2010(03)